[发明专利]一种用于卷烟接装纸生物学评价的Ames试验方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种用于卷烟接装纸生物学评价的Ames试验方法，属烟草技术领域。

背景技术：

卷烟接装纸虽不参加燃烧，但是却直接与消费者口腔接触。目前，对卷烟接装纸的关注主要集中于对其物理指标、微生物指标、重金属和品质指标的规范^[1～2]。随着减害降焦的不断深入，新型卷烟接装纸不断出现，需要深入开展卷烟接装纸安全性研究，从而为卷烟材料监管提供基础数据和理论支撑。

用于卷烟接装纸生物学评价的样品制备方法，虽然不是安全性评价工作的核心，但却是所有分析检测工作最初的一步。准确模拟实际暴露条件，制备卷烟接装纸在人工唾液中的迁移样品是影响后续安全性评价客观性、准确性及可靠性的关键因素和基本前提。

迄今为止，在国内外未见模拟卷烟接装纸与口腔接触的实际状况，进行接装纸生物学评价的Ames试验方法的公开报道。

参考文献：

[1]中华人民共和国烟草行业标准YC 170-2002《烟用接装纸原纸》.

[2]中华人民共和国烟草行业标准YC 171-2002《烟用接装纸》.

[3]宋瑜冰，宗永立，马骥，李鹏，张杰，彭书海.一种测定无烟气烟草制品中非极性或弱极性香味成分释放率的方法.专利申请号200910227274.3.

[4]中华人民共和国国家标准GB/T 16886.15-2003/ISO 10993-15：2000《医疗器械生物学评价第15部分：金属与合金降解产物的定性与定量》.

[5]毛友安，李军，古君品，刘巍，钟科军，魏万之.模拟人体口腔对吸烟过程中主流烟气吸收的装置.专利申请号200910226704.X.

[6]李雪梅，曾晓鹰，崔杨，杨叶昆，者为，段焰青，耿永勤，王明峰.一种全烟气捕集及其pH值测定的方法.专利申请号201010123588.1.

发明内容：

本发明的目的在于提供一种简便、实用的用于卷烟接装纸生物学评价的Ames试验方法。

本发明的一种用于卷烟接装纸生物学评价的Ames试验方法，包括样品原液制备及Ames试验，具体步骤如下：

a.采用中华人民共和国国家标准GB/T 16886.15-2003/ISO 10993-15：2000《医疗器械生物学评价第15部分：金属与合金降解产物的定性与定量》规定的人工唾液作为卷烟接装纸的浸提液；

b.量取一定面积的卷烟接装纸(如：量取卷烟接装纸600cm×6cm，相当于500支卷烟的接装纸用量；量取300cm×6cm，相当于250支卷烟的接装纸用量；量取卷烟接装纸240cm×6cm，相当于200支卷烟的接装纸用量；量取卷烟接装纸120cm×6cm，相当于100支卷烟的接装纸用量；量取60cm×6cm，相当于50支卷烟的接装纸用量)，剪成1cm×6cm的条状，置于具有磨口塞的50～250mL锥形瓶中备用；

c.按照装纸面积/浸提液比例为24～36cm²/mL向锥形瓶中注入浸提液，当卷烟接装纸全部浸入后盖好塞子；

d.模拟实际暴露条件，设置浸提温度为37±1℃；

e.将该锥形瓶置于37±1℃的水浴震荡器中震荡浸提5～180min，得到样品原液；

f.将e步骤得到的样品原液进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验，即：分别按10μL，50μL，250μL，500μL，1000μL掺入平板，分别计数TA 97、TA 98、TA 100、TA 102四个菌种在剂量下的回复突变菌落数；

g.根据Ames试验结果判别卷烟接装纸材料是否具有致突变作用，用于评价卷烟接装纸的安全性。

本发明的优点在于：能有效模拟抽吸卷烟时接装纸与口腔接触的实际状况制备样品，所选择的用于Ames试验的样品原液剂量范围合适，方法实用、简便。

附图说明：

附图为用于卷烟接装纸生物学评价的Ames试验方法工艺流程图。

具体实施方式：

下面将结合具体实施例对本发明做详细描述，但并不限制本发明。

实例一  用于HH卷烟接装纸评价

1实验部分

1.1试验材料及其制备

参照中华人民共和国国家标准GB/T 16886.15-2003/ISO 10993-15：2000《医疗器械生物学评价第15部分：金属与合金降解产物的定性与定量》规定的人工唾液制备方法，配制与口腔接触的卷烟接装纸的浸提液。