[发明专利]一种线粒体突变检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种检测人线粒体12SrRNA基因C1494T和A1555G突变的方法，其特征在于：以人基因组核酸为模板，用针对C1494T和A1555G突变型的引物组及内质控引物组进行多重PCR扩增，然后进行溶解曲线分析，通过有无特定温度的熔解峰来判断有无突变。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于设计引物时，各PCR扩增产物的Tm之间有明显的不同，以便在熔解曲线分析中得以区分。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于设计的引物5’端可加入高GC含量的无关序列，以调整相应扩增产物的Tm值。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于该方法中使用5条引物，它们的序列分别为序列表中序列1、序列2、序列3、序列4和序列5所示。

5.一种检测线粒体12SrRNA基因C1494T和A1555G突变的试剂盒，所述试剂盒包括：核酸DNA提取试剂、阴性对照品、扩增反应试剂及说明书，其特征在于：扩增反应试剂包括taq聚合酶、PCR缓冲液、Mg²⁺、dNTP及引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述引物有5条引物，它们的序列分别为序列表中序列1、序列2、序列3、序列4和序列5所示。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于核酸提取液含w/v为5％的chelex 100溶液。

8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于阴性对照品为不含线粒体核酸的溶液。