[发明专利]用于加速伤口愈合的药物组合物和方法

说明书

本申请是申请号为“200480029538.X”，发明名称为“用于加速 伤口愈合的药物组合物和方法”的发明专利申请的分案申请。

发明领域和背景

本发明涉及用于加速伤口愈合过程的方法和药物组合物。具体地 说，本发明利用由脂肪细胞分泌的生物活性分子(脂肪细胞素 (adipokine))、和调节脂肪细胞分化、增殖和/或活性的生物活性分 子诱导或加速皮肤伤口的愈合过程。

伤口治疗的主要目标是使伤口得以闭合。开放性皮肤伤口是一种 主要的伤口类型，包括烧伤、神经性溃疡、褥疮、静脉淤滞溃疡和糖 尿病性溃疡。

开放性皮肤伤口通常通过包括下述六个主要环节的过程愈合： (i)发炎；(ii)纤维原细胞增生；(iii)血管增生；(iv)结缔组 织生成；(v)上皮形成；(vi)伤口收缩。当这些环节个别或者整体 没有正常运行时，就会影响伤口的愈合。很多因素都可能影响伤口愈 合，包括营养不良、感染、药理学试剂(如放线菌素和甾族化合物)、 高龄和糖尿病[参见Hunt和Goodson的Current Surgical Diagnosis& Treatment(Way；Appleton&Lange)，第86-98页(1988)]。在身 体各部分接受外科手术之后也会出现伤口愈合的常见问题，即手术取 得成功但开放性伤口未愈合。

皮肤是一种复层鳞状上皮，在其中进行生长和分化的细胞是有严 格区分的。在生理状态中，增殖限于附着在基底膜的基底细胞上。分 化是一种空间过程，其中基底细胞失去对基底膜的附着，中止DNA 的合成并进行一系列的形态和生物化学变化。最终的发育成熟步骤是 角质层的产生形成皮肤的防护屏障(1，2)。当基底细胞开始分化，可 观测到的最早变化与基底细胞脱离和远离基底膜(3)的能力有关。 类似的变化与伤口愈合过程有关，在该过程中细胞迁移入受伤区域和 增殖的能力均得到增强。为了皮肤层的重构并诱导表皮层的适当分 化，这些过程是必须遵循的。

随着用于小鼠和人体角质形成细胞(2，4)的培养体系的发展，极 大地促进了对表皮细胞增长、分化和迁移的调节机制的分析。在体外， 角质形成细胞能以高生长率作为基础增殖细胞运用。此外，分化可能 在体内表皮的成熟模式之后在体外被引发出来。初期的现象包括半桥 粒部分(3，5)的损失和α6β4整联蛋白与基质蛋白细胞附着的选择性 损失。这表明，在整联蛋白表达方面的改变是在角质形成细胞分化中 的早期现象。早期的半桥粒接触损失导致角质形成细胞的上基部迁 移，并且与在培养的角质形成细胞中和在皮肤(1，3，6)中角蛋白1(K1) 的诱导有关。此外，对粒层表型的分化与下述因素有关：β1和β4整 联蛋白表达的负调节、对所有基质蛋白的附着潜力的损失以及继之以 角质化包膜的形成和细胞死亡。分化细胞最终以成熟鳞屑(2，7)形式 从培养皿中脱落。上述体外分化程序紧接着体内表皮的成熟模式。

伤口愈合可以通过体内各种直接或间接加速表皮细胞增殖、分化 和/或迁移的生物活性试剂引发。因此，美国专利5,591,709和5,461,030 中记载了通过利用如胰岛素、生长激素、三碘甲状腺原氨酸和甲状腺 素的非甾族合成代谢激素诱导伤口闭合。美国专利5,145,679记载了 通过利用胰岛素和胰酶诱导伤口闭合。美国专利6,541,447记载了通 过利用生长因子和生长激素的混合物诱导伤口闭合，国际申请 PCT/IL01/00675记载了通过利用PKC调节试剂诱导伤口闭合。然而， 现有技术中没有关于利用脂肪细胞、脂肪细胞调节剂或脂肪细胞分泌 的分子来诱导或加速与伤口愈合有关的过程的教导。

因此，广泛认识到需要有一种促进伤口愈合的新方法，这将是非 常有益的。本发明提供了一种治疗伤口的新方法，所述方法利用脂肪 细胞、能够分化为脂肪细胞的细胞、由脂肪细胞分泌的产物和脂肪细 胞调节剂来诱导或加速与伤口愈合有关的过程。

发明概述

在进行伤口愈合研究的实验过程中，本发明的发明者发现，在早 期愈合过程期间，脂肪细胞与在伤口缝(gap)迁移性角质形成细胞 密切相关，这表明脂肪细胞、脂肪细胞调节剂和脂肪细胞素与伤口愈 合过程有关，因而可能用来影响伤口愈合的过程。

在对本发明进行实践时，如优选方案以及下述实施例部分中进一 步描述的那样，发现向伤口给药脂肪细胞素或脂肪细胞调节剂确实实 质上有效地促进了伤口的愈合。