[发明专利]hIL-17RD-ECD单克隆抗体的制备及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种单克隆抗体的制备和应用，尤其涉及一种hIL-17RD-ECD单克隆抗体的制备及应用。

背景技术

Th17细胞分泌的IL-17包括IL-17A和IL-17F这两个炎症分子，他们都是通过IL-17受体家族传递信号，从而影响下游基因表达的。白介素17受体家族(IL-17receptor)是一种广泛存在于免疫活性细胞上的免疫性受体，能介导IL-17信号通路，具有很多重要的生理功能。目前已经发现了小鼠和人IL-17RD可以传递IL-17信号传导，并和IL-17RA形成杂合二聚体。

目前，对IL-17RA在基因克隆，蛋白表达等方面都进行了大量的研究，并取得了很大进展，而对IL-17RD的研究相对较少。IL-17RD在一次大规模的原位杂交中被发现，而此次原位杂交旨在筛选出在斑马鱼胚胎发育过程中空间限制基因。这些在类似的空间和时间表达的基因形成一个相互调控在共同通路中相互作用的家族。IL-17RD表达模式与成纤维细胞生长因子基因家族相似，而其表达也是受到FGFs调控的。自从IL-17RD首次从斑马鱼中被发现以来，在鸡，鼠，人类中其直系统同源都被鉴定出来。IL-17RD基因只存在于脊椎动物中，定位于单一的基因座。然而，通过可变联结机制形成了IL-17RD异构体具有不同的生物化学和生物学特性。

因此，进一步对IL-17RD的活性和作用机制的研究称为热点。

发明内容

本发明一个目的是提供一种保藏号为CGMCC No.4576的小鼠杂交瘤细胞(musmusculus hybridoma)1F8。

本发明提供了一种保藏号为CGMCC No.4576的小鼠杂交瘤细胞(mus musculushybridoma)1F8。

本发明另一个目的是提供由保藏号为CGMCC No.4576的小鼠杂交瘤细胞(musmusculus hybridoma)1F8产生的单克隆抗体。

本发明提供了由保藏号为CGMCC No.4576的小鼠杂交瘤细胞(mus musculushybridoma)1F8产生的单克隆抗体。

所述的单克隆抗体在制备白介素17受体D检测试剂盒中的应用也是本发明保护的范围。

所述的单克隆抗体在制备检测白介素17受体D的胶体金快速检测试纸条中的应用也是本发明保护的范围。

含有所述的单克隆抗体的检测白介素17受体D的试剂盒也是本发明保护的范围。

含有所述的单克隆抗体的检测白介素17受体D的胶体金快速检测试纸条也是本发明保护的范围。

经筛选得到能稳定分泌抗人白介素17受体D(hIL-17RD)的单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F8，该杂交瘤细胞株1F8的分类命名为小鼠杂交瘤细胞mus musculushybridoma，已于2011年2月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏号为CGMCC No.4576。

本发明的实验证明，本发明筛选得到1株能稳定分泌抗人白介素17受体D(hIL-17RD)的单克隆抗体的杂交瘤细胞，并对其进行生物学特性鉴定，以期进一步探讨hIL-17RD基因与自身免疫疾病如类风湿性关节炎之间可能存在的相互关系及其功能的深入研究提供依据和奠定基础，制备抑制类风湿关节炎等自身免疫疾病的潜在药物蛋白。

附图说明

图1为hIL-17RD-ECD蛋白的SDS-PAGE分析

图2为阳性杂交瘤细胞特异性筛选

图3为抗hIL-17RD的单克隆抗体的类型鉴定

图4为腹水抗体效价的测定

图5为单抗纯度及分子质量鉴定

图6为Western blot检测内源hIL-17RD的结果

图7为Western blot检测外源的hIL-17RD和hIL-17RD-ECD

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、单克隆抗体的制备

1、动物免疫