[发明专利]一种利用动物血液和脾脏分离提取活性多肽和免疫核糖核酸的方法无效
申请号: | 201110041137.8 | 申请日: | 2011-02-21 |
公开(公告)号: | CN102167726A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
发明(设计)人: | 蒋士策;蒋明达;虞文洲;夏雪 | 申请(专利权)人: | 山东省莘县金鑫畜禽有限公司 |
主分类号: | C07K1/36 | 分类号: | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C12N15/117 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 252400 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 动物 血液 脾脏 分离 提取 活性 多肽 免疫 核糖核酸 方法 | ||
1.一种利用动物血液和脾脏分离提取活性多肽和免疫核糖核酸的方法,其特征在于采用以下步骤:
(1) 去除脂肪:取畜禽类脾脏,去除原料中的脂肪;
(2) 称量清洗:精确称量出去除脂肪后原料,用纯化水清洗2~3遍;
(3) 粗粉碎:将脾脏与血液和纯化水按相应比例混合,用胶体磨将其研磨数分钟,制成匀浆;脾脏与纯化水的重量比为1:2,脾脏与血液的重量比为1:5;
(4) 超微粉碎:将匀浆经过细胞破碎机进行超微破碎,破碎后的溶液装入灭菌后的容器中;
(5) 灭活:按破碎液总量的0.2%加甲醛溶液,36~38℃灭活;
(6) 冻融:将灭活的匀浆,置-38℃冷库冷冻后解冻;
(7) 离心分离:将解冻的匀浆置2℃,以3600r/min离心15分钟,去除沉淀,取上清液备用;
(8) 过滤层析:先将上清液经过粗滤,再利用层析柱进行层析,并收集层析液;
(9) 精滤:将层析液用2μm的微孔滤膜进行过滤,然后用截留分子量为12000道尔顿超滤膜进行精滤;
(10) 配制:将精滤后的溶液移入配液罐中,用盐酸或氢氧化钠溶液调pH至6.8~7.5之间,混匀;
(11) 分装:定量分装,加盖密封;活性多肽含量不低于1.8毫克/毫升,核糖核酸含量不低于60微克/毫升;
(12) 保存:在-28℃条件下冷冻保存。
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