[发明专利]一种诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒及制备与使用方法

权利要求书

1.一种诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒，其特征是检测试剂盒中至少有四条驽巴贝斯虫特异性引物组成，这四条引物是：上游外侧引物为序列表中SEQ IDNO：1的核苷酸序列Bc F3；下游外侧引物为序列表中SEQ ID NO：2的核苷酸序列Bc B3；上游内引物Bc FIP是由序列表中SEQ ID NO：3的核苷酸序列Bc F1c与序列表中SEQ ID NO：4的核苷酸序列的上游中间引物Bc F2经连接子L1连接而成的；下游内引物Bc BIP是由序列表中SEQ ID NO：5的核苷酸序列Bc B1c与序列表中SEQ ID NO：6的核苷酸序列的下游中间引物Bc B2经连接子L2连接而成的，连接子L1和L2是由4～6个核酸碱基组成。

2.根据权利要求1所述的诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒，其特征是上游内引物Bc FIP为序列表中SEQ ID NO：7的核苷酸序列Bc FIP-I；下游内引物Bc BIP为序列表中SEQ ID NO：8的核苷酸序列BcBIP-I。

3.根据权利要求1或2所述的诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒，其特征是检测试剂盒中还分别放置有LAMP反应缓冲液、DNA聚合酶、灭菌超纯水。

4.权利要求1至3所述的任一诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒的使用方法，其特征是以待测马属动物血液提取血液基因组DNA为模板，将其与DNA聚合酶、缓冲液、灭菌超纯水以及试剂盒中的驽巴贝斯虫特异性引物混合物按比例混合均匀后，进行环介导的恒温扩增，扩增后立刻灭活DNA聚合酶，取扩增产物以TAE为缓冲液，再置于含溴化乙锭的琼脂糖凝胶中，进行电泳，在紫外灯下观察，根据特定泳道是否出现特异性电泳带型确定被检动物是否患有驽巴贝斯虫病。