[发明专利]用于治疗缺血性脑血管疾病的制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种可以治疗缺血性脑血管疾病的制剂及其制备方法。

背景技术

心脑血管疾病是世界上致死率和发病率最高的疾病。根据2010年美国心脏学会的统计报告指出，2005年全世界大约有1750万人死于各类心脑血管疾病，大约占死亡总人数的30％。预计到2020年，全球因心脑血管疾病死亡人数将达2500万人。在2004年欧洲有430万人死于各类心脑血管疾病，高达总死亡人数的48％。在各类心脑血管疾病中，动脉粥样硬化所导致的血栓及血管堵塞是最常见和最重要的发病机理。在疾病初期，由活性氧激发的对低密度脂蛋白的修饰会逐渐导致血管内皮机能障碍。机体的免疫系统对此产生慢性炎症并持续分泌富含T细胞，巨噬细胞，肥大细胞的白血球细胞群，并形成脂纹，纤维斑块，粥样斑块，使血管腔狭窄并导致血流量减少。当最终粥样斑块破碎后，脱落的碎斑会导致血小板聚集并产生大规模的闭合性血栓及其他继发性改变，包括由该动脉所供应养份的组织或器官的缺血或坏死。由动脉粥样硬化所导致的缺血性心脑血管疾病主要包括有冠心病，缺血性中风，以及外周闭塞性动脉疾病。缺血性中风是由血栓(脑部形成阻塞血块)，栓塞(栓塞从其他地方形成，见下)，系统性供血不足(一般性系统性供血不足，如休克)或静脉血栓引起的脑部供血不足，导致脑组织功能障碍及坏死。全球每年的中风患者有1500万人，并导致500万人终身残疾及570万人死亡，其中87％属于缺血性中风。在美国，平均每40秒就有一人会发生中风，平均每4分钟就有一名患者死于中风。在世界范围内中风也是第2大死因。尽管有保守锻炼，抗凝药物，和手术(颈动脉内膜切除或颈动脉血管成形)的传统治疗手段，大部分由动脉粥样硬化所导致的缺血性中风病患者依然无法获得有效的治疗，究其原因，主要是因为对抗凝药物的副作用，以及身体或疾病条件而无法进行有效的手术等。

干细胞疗法是近年来在治疗癌症和心脑血管疾病等领域最受人期待的新发展方向。从理论上讲，干细胞可以用于各种疾病的治疗，但其最适合的疾病主要是组织坏死性疾病如缺血引起的心肌坏死，退行性病变如帕金森综合征，自体免疫性疾病如胰岛素依赖型糖尿病等。尤其是其具有的促进血管再生和器官功能恢复的特殊功效，在心脑血管疾病的治疗中有着巨大疗效。

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSC)是来源于早期中胚层的一种具有多向分化潜能的成体干细胞。MSC理论上可分化为所有中胚层来源的细胞，例如内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞等，并且具有低免疫活性，同种异体移植不会产生免疫排斥。MSC广泛存在于全身结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量最为丰富，也可从胎儿脐血中分离得到，还存在于胎盘、羊水、脐静脉内皮下层、外周血及肝脏、脂肪、肌肉、皮肤等多种组织中。在适宜的条件下，MSC能够聚集在局灶性脑缺血大鼠缺血区脑组织中，并具有促进缺血区新生血管形成及改善神经功能的趋势，新生血管的形成和血液循环的重建，有助于脑缺血半暗带区受损而未死亡神经元的修复，并可为自身神经干细胞向缺血区迁移和分化，对损伤神经组织的修复及重建具有重要意义。

而MSC促进缺血区血管新生的原因，是由于来源于MSC的内皮祖细胞向血管内皮细胞分化及提高缺血区生长因子和细胞活素(例如VEGF)的表达，进而促进缺血区血管生成的结果。事实上，移植的MSC在参与缺血脑组织修复中分泌出的生长因子和细胞活素，可借由MSC在体外特定环境中所分泌的条件培养基中获得，并完全可能将其应用于受损血管及周边组织的修复和再生，从而恢复缺血性坏死的脑组织的相应功能。因此，MSC在体外人工环境中分泌的促血管及周边组织修复或再生的生长因子和细胞活素在临床上有巨大的潜力，可以作为干细胞疗法的有效替代品或辅助药物应用于缺血性脑血管疾病的治疗中。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够有效的治疗缺血性脑血管疾病的制剂，用于克服现有药物的不足，为临床治疗缺血性脑血管疾病提供一种新的治疗药物。

上述缺血性脑血管疾病主要指由于动脉粥样硬化导致的血管阻塞类的疾病，具体包括：脑动脉硬化引起的中风，脑缺血、脑梗塞，脑萎缩，梗塞型痴呆。

本发明的目的还在于提供一种制备能够有效的治疗缺血性脑血管疾病的制剂的方法，该方法步骤为：

1)从健康人血液中通过白细胞置换(leukapheresis)获取外周血单核细胞，或从骨髓中(通过密度梯度离心的方法，可选步骤)获取骨髓单核细胞，或从人脂肪吸取物(lipoaspirate)中直接提取MSC；

2)筛选及培养外周血或骨髓单核细胞以获得MSC细胞；