[发明专利]红酵母及其产海藻糖的方法

权利要求书

1.一种红酵母2-14(Rhodotorula sp. 2-14)CGMCC NO. 4445。

2.根据权利要求1所述的红酵母2-14(Rhodotorula sp.2-14)CGMCC NO. 4445，其特征在于，该菌株具有以下特征：

(1) 形态特征：细胞呈圆形或椭圆形，其大小4.5~5.1×6.3~7.2μm，繁殖方式为芽殖，无假菌丝、子囊孢子及掷孢子形成；

(2) 培养特征：发酵液清，表面无醭、无环、无气泡、无沉淀；菌落饱满潮湿，颜色为红色，边缘整齐，无褶皱，好氧；

(3) 生理生化特征：菌株对乳糖、半乳糖、可溶性淀粉、L-山梨糖、D-木糖、D-果糖、L-鼠李糖、麦芽糖、海藻糖、甘露醇、核糖、葡萄糖、蔗糖、琥珀酸、柠檬酸均不发酵；菌株不液化明胶，脲酶阳性，葡萄糖氧化阴性，DBB阳性，类淀粉化合物形成结果为阴性，石蕊牛奶试验产碱，在37 ℃条件下正常生长。

3.一种如权利要求1所述的红酵母2-14(Rhodotorula sp.2-14)CGMCC NO. 4445产海藻糖的方法，其特征在于，其步骤如下：

(1) 菌种的准备：将红酵母2-14菌株在灭过菌的丰富培养基平板上划线，于30℃静置培养2天后，挑取单菌落进行丰富培养基斜面培养2天后保存于4℃冰箱中备用；所述的丰富培养基为：马铃薯20%，蔗糖 2%，琼脂1.5%；

(2) 细胞的培养：挑取斜面培养的菌种，接种到装有50mL液体培养基的250mL三角瓶中，在20~35℃，100~200 r/min，的摇床上培养18~30h后得种子液，将种子液按5%的接种量接种于含有75mL液体培养基的250mL三角瓶中，28℃，160 r/min摇床培养50~60h后取出，在5000 r/min离心除去上清液，所得菌体细胞用0.85% NaCl溶液洗涤一次，置于4℃冰箱中贮存备用；所述的液体培养基为：蔗糖31g，酵母膏9.9g，蛋白胨9.9g，氯化铵2.2g，磷酸二氢钾0.4g，磷酸氢二钠0.4g，硫酸镁0.2g，氯化钙0.2g，三氯化铁0.2g，煮沸过滤陈海水1000mL，pH5.5；

(3)海藻糖的提取：向菌体细胞中加入蒸馏水，每40g菌体细胞中加入1L蒸馏水，于80℃水浴提取，离心，取上清液加活性炭脱色，过滤除去活性炭，上清液真空浓缩到原体积的1/4～1/5，用截留分子量为500的超滤膜超滤除去大分子杂质，采用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂进行离子交换除去离子，真空浓缩，冷却结晶，恒温干燥，即得食用级海藻糖产品。

4.根据权利要求3所述的产海藻糖的方法，其特征在于：步骤（2）中：挑取斜面培养的菌种，接种到装有50mL液体培养基的250mL三角瓶中， 25~30℃，140~180 r/min摇床上培养18~30h得种子液。

5.根据权利要求3所述的产海藻糖的方法，其特征在于：步骤（2）中：挑取斜面培养的菌种，接种到装有50mL液体培养基的250mL三角瓶中，28℃，160 r/min摇床上培养24h得种子液。