[发明专利]一种环境中雄激素的检测方法无效
申请号: | 201110043216.2 | 申请日: | 2011-02-23 |
公开(公告)号: | CN102168138A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
发明(设计)人: | 张利红;张燊;张扬;张为民 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/66 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 环境 激素 检测 方法 | ||
1.一种环境中雄激素的检测方法,是用黄鳝脑芳香化酶基因垂体特异启动子连接荧光素酶报告基因载体,构建报告质粒,将报告质粒、黄鳝雄激素受体表达质粒和内参质粒共转染LbetaT2细胞,用待测样品刺激转染后的LbetaT2细胞,通过检测荧光素酶的活性来检测样品中的雄激素。
2.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述黄鳝脑芳香化酶基因垂体特异启动子序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述荧光素酶报告基因载体为pGL3-Basic。
4.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述内参质粒为pRL-TK。
5.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述共转染LbetaT2细胞所用试剂为Lipofectamine 2000,且转染后在无酚红高糖 DMEM培养基中培养4-6小时后,更换新的培养基再培养22-26小时。
6.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述用待测样品刺激转染后的LbetaT2细胞,通过检测荧光素酶的活性来检测样品中雄激素,是在样品刺激后22-26小时再检测荧光素酶活性。
7.根据权利要求1所述环境中雄激素的检测方法,其特征在于所述雄激素为二氢睾酮。
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