[发明专利]一种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物及其在制备抗疲劳产品的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种冬虫夏草菌丝体发酵提取物，具体来说是涉及一种冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)菌丝体固体发酵提取物，另外还涉及这种固体发酵提取物在抗疲劳方面的应用。

背景技术

近年来，研究开发抗疲劳的天然药物已成为国内外的关注热点。冬虫夏草作为一种滋补中药，具有保肺益肾、止咳化痰、治阳痿遗精及腰膝酸痛等功效，是最贵重的一种药用真菌，其重要的药用价值和广泛的药理作用享誉全世界。现代研究表明，冬虫夏草在消除运动性疲劳和增强运动能力方面有其独特的优势，不仅能增加运动员体内的能量物质，而且有调节神经内分泌、加强代谢等作用，并可刺激体内激素的分泌释放，增强心血管系统、消化系统以及造血系统、骨骼系统等功能，延缓过度疲劳的产生。

目前有关于天然冬虫夏草、冬虫夏草头孢虫草(即冬虫夏草菌种，是冬虫夏草的无性型)液体培养菌丝体及其滤液的抗疲劳效果研究(郑伟等。三种冬虫夏草制剂抗疲劳作用的比较。航空军医，2003，31(2)：49-50)，发现菌液组对增强小鼠记忆力效果最好。还有关于蝙蝠蛾拟青霉发酵所产生的冬虫夏草菌丝体的抗疲劳作用的研究(陈新霞等。冬虫夏草菌丝体的抗疲劳作用研究。中国生化药物杂志，2009，30(5)：321-323)，结果表明冬虫夏草菌丝体能显著延长小鼠负重游泳时间(P＜0.05)，增加小鼠肝糖原储备量(P＜0.01)，降低运动后小鼠血乳酸含量(P＜0.01)，具有明显的抗疲劳作用。因此现在开发出很多冬虫夏草菌丝体的保健品，但大多数是以液体深层发酵的方法来获得菌丝体的，如中国专利200810167083.8披露了一种冬虫夏草菌丝体饮料及其制备方法，中国专利200910110525.X披露了一种人工发酵培养冬虫夏草在制备抗疲劳、耐缺氧保健品或药品中的应用。此外，也有研究表明人工固体发酵培养的冬虫夏草菌丝体虫草多糖含量明显高于天然虫草(刘仲敏等。人工固体发酵培养冬虫夏草菌丝体的研究。河南科学，1994，12(4)：335-338)，以及冬虫夏草菌丝体固体发酵粉中3’-脱氧腺苷，甘露醇的含量明显高于冬虫夏草子实体相应的成分的研究(王尊生，等。冬虫夏草菌丝体固体发酵粉化学成分的分析。天然产物研究与开发，2005，17(3)：331-336)。但还没有利用冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物来开发抗疲劳产品的报道或相关的技术专利。

发明内容

本发明的目的在于开发出一种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物，另外还开发出这种冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物在抗疲劳方面的用途。

我们将野生冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)子实体通过菌种收集、保藏与复壮，母种、一级液体种和二级生产种的制作，固体发酵物的制备，固体发酵提取物的提取等步骤，得到的冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物能够有效提高负重游泳小鼠的游泳时间，从而实现了本发明的目的。

本发明的冬虫夏草菌丝体固体发酵提取物，其特征是由包括以下步骤的方法制备得到：

(1)将野生冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)子实体进行组织分离，于冬虫夏草斜面培养基上培养，获得纯菌株，并进行复壮，所述的冬虫夏草斜面培养基按其总质量分数100％计，由葡萄糖1％～2％，蛋白胨0.5％～1％，麦芽浸出粉0.3％～0.5％，酵母浸膏0.3％～0.5％，琼脂2％和余量的水组成；

(2)将步骤(1)的纯菌株接入无菌的冬虫夏草斜面培养基中，10～15℃下，暗培养30～35天后，光照4～6天，选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种，作为母种，所述的冬虫夏草斜面培养基组成与步骤(1)相同；

(3)将母种经复壮挑选后接至无菌冬虫夏草液体培养基中，振荡培养10～20天，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为一级液体菌种，所述的冬虫夏草液体培养基pH 6.0～6.5，按其总质量分数100％计，由葡萄糖1％～2％，蛋白胨0.5％～1％，麦芽浸出粉0.3％～0.5％，酵母浸膏0.3％～0.5％和余量的水组成；

(4)将步骤(3)得到的一级液体菌种接入冬虫夏草液体培养基中进行培养，一级液体菌种体积是冬虫夏草液体培养基体积的3％～10％，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为二级生产种，所述的冬虫夏草液体培养基及培养方法与步骤(3)相同；