[发明专利]一种非损伤性提取普氏野马免疫球蛋白IgA的方法无效
| 申请号： | 201110044813.7 | 申请日： | 2011-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN102180967A | 公开（公告）日： | 2011-09-14 |
| 发明（设计）人： | 葛兴芳;胡德夫;杨亮亮;于小杰;郎冬梅;王毅花 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 损伤 提取 野马 免疫球蛋白 iga 方法 | ||
1.一种提取动物免疫球蛋白的方法，包括以下步骤：
将动物粪便与提取缓冲液混合，得到混合物；将所述混合物离心，取上清液，即得到所述动物免疫球蛋白；所述提取缓冲液由PBS缓冲液和吐温-20组成。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述提取缓冲液中，所述吐温-20的体积百分比浓度为0.01％-0.5％或0.03％-0.07％或0.03％或0.04％或0.05％或0.06％或0.07％。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
所述离心的方法包括以下步骤：将所述混合物进行第一步离心，取上清液，记作上清液I；将所述上清液I进行第二步离心；所述第一步离心的转速为2000rpm、温度为25℃和时间为20min；所述第二步离心的转速为10000rpm、温度为4℃或25℃和时间为10min。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：在将所述混合物离心前，包括将所述混合物混匀的步骤。
5.根据权利要求1-4中所述的方法，其特征在于：所述混匀的方法为将所述混合物用涡旋仪在1200rpm下振荡10min。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述PBS缓冲液由氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和水组成，各成分的浓度分别为氯化钠8.5g/L、磷酸二氢钠0.3g/L和磷酸氢二钠2.2g/L。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述提取缓冲液的pH值为7.2。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述提取缓冲液的用量为：每1g所述动物粪便中加入10mL所述提取缓冲液。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述动物粪便为混匀后的动物粪便。
10.根据权利要求1-9中任一所述的方法，其特征在于：
所述动物为普氏野马；
所述免疫球蛋白为免疫球蛋白IgA。
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