[发明专利]一种双指标检测用胶体金试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种双指标检测用胶体金试纸条，包括试纸条底衬，以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的样品垫、涂覆有金标抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，其特征在于包被膜还设有与所述的控制线平行的两条检测线，分别包被能与待检抗原之一特异结合的抗体；所述金标抗体有两种，分别为胶体金标记的能与待检抗原之一特异结合的抗体。

2.根据权利要求1所述的双指标检测胶体金试纸条，其特征在于所述的与待检抗原之一特异结合的抗体为能够与待检抗原之一特异结合的单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段或嵌合抗体。

3.根据权利要求1所述的双指标检测胶体金试纸条，其特征在于所述的两条检测线中一条包被N-端脑利钠肽前体多克隆抗体，另一条包被心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。

4.根据权利要求3所述的双指标检测胶体金试纸条，其特征在于所述的金标抗体为胶体金标记的N-端脑利钠肽前体单克隆抗体和胶体金标记的心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。

5.一种权利要求1所述的一种双指标检测用胶体金试纸条的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)制备包被膜：用包被缓冲液分别稀释能与待检抗原之一特异结合的抗体以及兔抗鼠IgG抗体，并将稀释后的三种抗体分别平行地喷于硝酸纤维素膜的中部上，三种抗体渗入硝酸纤维素膜后分别形成两条检测线和兔抗鼠IgG抗体包被的控制线；

2)制备涂覆金标抗体的聚酯膜：分别制备两种胶体金标记的能与待检抗原之一特异结合的抗体，利用这两种金标抗体混合物涂覆聚酯膜；

3)组装试纸条：在试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴样品垫、涂覆有金标抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸。

6.根据权利要求5所述的一种双指标检测用胶体金试纸条的制备方法，其特征在于步骤1)所述的制备包被膜：用包被缓冲液稀释N-端脑利钠肽前体多克隆抗体、心肌肌钙蛋白I单克隆抗体以及兔抗鼠IgG抗体，并将稀释后的三种抗体分别平行地喷于硝酸纤维素膜的中部上，三种抗体渗入硝酸纤维素膜厚分别形成包被N-端脑利钠肽前体多克隆抗体的检测线、包被心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的检测线和兔抗鼠IgG抗体的控制线。

7.根据权利要求5所述的一种双指标检测用胶体金试纸条的制备方法，其特征在于步骤2)所述的制备涂覆金标抗体的聚酯膜的方法是：将胶体金调节为碱性条件下，加入链亲和素溶液，封闭反应后，加入接有生物素的抗体反应，离心去上清，沉淀以金标抗体保存液恢复体积。

8.根据权利要求7所述的一种双指标检测用胶体金试纸条的制备方法，其特征在于所述的接有生物素的抗体为接有生物素的N-端脑利钠肽前体单克隆抗体或接有生物素的心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体。

9.权利要求1所述的双指标检测胶体金试纸条在同时检测两种待测抗原中的应用。

10.权利要求1所述的双指标检测胶体金试纸条在同时检测N-端脑利钠肽前体和心肌肌钙蛋白I中的应用。