[发明专利]一种茶树抗寒性早期鉴定方法

说明书

技术领域

本发明属于植物学领域，涉及一种茶树抗寒性鉴定方法，尤其是一种通过测定茶树叶片中蔗糖含量进行抗寒性鉴定的方法。

背景技术

我国是茶树的原产地，也是世界上最早种茶、制茶、饮茶的国家，我国人工栽培茶树有3000多年历史，茶叶是我国的“国饮”，是茶叶生产和消费大国，2009年我国茶树种植面积为180万公顷，产量超过130万吨，均居世界首位。茶叶也是世界公认的最重要的天然保健饮料，全世界有60个国家种茶，进口茶叶的国家遍及150多个国家和地区，20多亿人钟情于茶饮。随着健康饮料消费观念的变化，茶叶的消费和贸易前景更为广阔。茶叶生产在我国农业经济、农村发展和社会主义新农村建设方面占有举足轻重的地位，尤其在很多丘陵山区，其经济地位更为突出。

低温是影响茶树分布与种植的重要生态因子，风冻、霜冻、冰雪冻在我国大部分茶区春、秋、冬季经常发生，致使茶树全部冻死或严重冻伤，造成大幅减产、品质降低。茶树的抗寒性具有较高的遗传力，不同的茶树品种其抗寒能力差异显著，快速、可靠的茶树抗寒性相关的指标可为茶树抗寒性鉴定和抗寒品种的筛选提供重要依据。目前主要是从以下几个方面对茶树的抗寒性进行研究：

1、叶片解剖结构与茶树抗寒性

有研究表明：叶片上表皮厚度、栅栏组织厚度、栅状组织厚度与叶片总厚度的比值、栅状组织与海绵组织厚度的比值与抗寒性呈强度正相关。该指标与茶树生长的实际抗寒性表现有时有矛盾，不够准确和可靠。

2、组织自由水和束缚水含量与茶树抗寒性

叶片自由水与束缚水所起的作用是不同的，束缚水的相对含量较高，自由水的相对含量较低时，有利于抗冻。有人认为，叶片组织自由水含量、组织束缚水含量两者之比值可以作为衡量茶树品种抗寒性的一个生理指标。该指标未做深入、系统的研究，还处于理论推测阶段。

3、细胞液浓度与茶树抗寒性

细胞液浓度反映细胞内含物和水分比例的关系，细胞液浓度高，可溶性糖和蛋白质的含量高，细胞内的束缚水含量就高，自由水含量则相对减少，抗冻性就强。叶片汁液的折射率反映了细胞液的浓度，细胞液浓度高，汁液的折射率大。因此，有人认为，叶片汁液折射率可以作为茶树抗寒性鉴定指标。该指标也未做深入、系统的研究，还处于理论推测阶段。

4、电导率和电阻值与茶树抗寒性

有研究结果显示，抗寒性强的品种或受害轻者不仅膜透性增大的程度较小，并且透性的变化可以逆转，易于恢复正常，故电阻值大。反之，抗寒性弱的品种或受害严重者不但膜透性增加，而且这种变化不可逆转，不能恢复正常，以至造成伤害甚至死亡。有人认为，叶片电阻值和电导率可作为茶树抗寒性强弱的一个理化指标。电导法在实际测定中所受到的影响因素较多，温度、浸泡时间以及空气中CO₂的溶解等等都会对实际测定的电导值产生影响，故而使得测定结果重复性较差。

5、丙二醛(MDA)含量与茶树抗寒性

有研究认为，不同茶树品种遭受冻害后，其丙二醛含量变化存在差异，积累越多表明组织的保护能力越弱，细胞膜遭受破坏越严重，抗寒性也就越弱。但MDA含量只是在不同低温下存在差异，在各品种间则差异不显著。

6、保护性酶类与茶树抗寒性

植物体在低温条件下细胞内的自由基产生和消除的平衡会遭到破坏，积累的自由基对植物的膜系统造成伤害，使膜脂产生过氧化作用，导致细胞膜的结构和功能受到破坏。而自由基的产生和消除又被细胞中的保护酶系所控制，保护系统包括SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)、POX(过氧化物酶)、谷胱甘肽过氧化物酶等酶类以及Ve、Va、Vc、辅酶Q、类胡萝卜素等还原性物质。茶树体内这些酶受低温直接或间接的影响而发生活性变化，有人认为，可利用酶的活力作茶树抗寒性鉴定指标。该指标与茶树生长的实际抗寒性表现有矛盾，不够准确和可靠，还需做深入、系统的研究。

发明内容

本发明是为了解决现有技术存在的不足，提供一种通过测定茶树叶片中蔗糖含量来鉴定茶树抗寒性(蔗糖含量与茶树抗寒性正相关)，为鉴定和筛选抗寒性强的茶树品种及茶树引种提供依据。

一种茶树抗寒性早期鉴定方法，通过测定茶树叶片中蔗糖含量来鉴定茶树抗寒性，所述蔗糖糖含量测定方法包含以下步骤：

A.样品提取液制备

1)取茶树成熟鲜叶片25g，剪成0.2-0.5cm²碎片；

2)将步骤1)剪碎后的叶片加入纯水中，密封条件下，在90℃水浴中浸提1h；叶片与纯水浸提百分比是1∶10