[发明专利]一种脾虚证慢性萎缩性胃炎胃癌前病变动物模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胃炎胃癌前病变动物模型的建立方法，特别涉及一种脾虚证慢性萎缩性胃炎胃癌前病变动物模型的建立方法，属于中医脾虚证慢性萎缩性胃炎基础研究和实验动物学领域。 

背景技术

慢性萎缩性胃炎（CAG）是以胃黏膜局部性或广泛性的固有腺体萎缩、数量减少或消失、黏膜层变薄、黏膜肌层变厚的消化系统疾病，其发病率高、易反复发作、难以治愈。研究表明：CAG癌变发生率是10%-19%；而绝大多数胃癌患者均有CAG病史，故CAG是胃癌癌前病变主要状态之一。临床上CAG可分为三个时期，即早期、中期和晚期。早期主要由于炎性损伤与修复的反复，胃黏膜上皮损伤性修复不足以修复炎性损伤，胃黏膜日益萎缩，少部分患者可发生小肠上皮化生；中期则由于持续性炎症或炎症反复发作，而修复功能的持续性损伤，胃黏膜萎缩进行性加重，胃黏膜萎缩基础上的肠上皮化生成为主要的病变，且胃黏膜肠上皮化生由小肠上皮化生向大肠上皮化生演变；晚期则由于病程过长，胃功能长期受损，食物消化吸收功能低下，加上疾病的消耗，免疫功能，尤其是细胞免疫功能低下，难以根除炎性反应，胃组织自身修复功能严重不足，加上成熟及较为成熟的胃黏膜上皮细胞较未成熟或低成熟细胞更易受损（死亡或凋亡），胃黏膜上皮细胞分化度不断降低，新生细胞难以正常分化成熟，转而化生为成熟度更低的大肠型上皮细胞，低分化细胞的增殖调控能力日益丧失，在分化受到抑制、增殖失常的情况下极易发展为不典型增生，此外由于细胞免疫功能失常，不典型增生难以诱发免疫效应，不典型增生最终恶变为胃癌。因此CAG防治的重点在于逆转胃黏膜萎缩与肠上皮化生，阻断肠上皮化生基础之上不典型增生的恶变，而肠上皮化生基础之上的不典型增生作为CAG向胃癌转变的关键时期，是胃癌预防的最后一道防线。 

目前，临床治疗CAG的主要药物为中药，一方面是由于临床缺乏治疗CAG的西药，另一方面，中药具有可逆转胃黏膜萎缩与肠上皮化生、阻断不典型增生等优点，因此开发CAG防治效应的中药制剂，具有重大意义。然而由于CAG发病机制，尤其是对中医病因病机缺乏系统研究，因此，其发病机制尚未完全阐明，目前仍缺乏符合中药辩证用药特点的、病与证相结合的动物模型，严重制约了抗CAG中药的开发。考虑到临床CAG患者主要以中晚期为主，而中晚期肠上皮化生基础上的不典型增生是胃癌预防的关键时期，因此，在进行CAG的相关研究时，复制肠上皮化生伴不典型增生为特征的CAG胃癌前病变模型尤为重要。 

现代医学表明，胃癌的发生与化学致癌物关系密切，长期低剂量接触致癌物，可诱导胃癌的发生，以特定剂量持续给药，在特定时期，致癌剂可诱发胃黏膜的萎缩、肠上皮化生和不典型增生。如N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG），无论以何种方式摄入体内，均可诱发胃黏膜萎缩和肠上皮化生，可以模拟CAG早、中和晚期整个病变进程，MNNG自由饮用所诱导的CAG模型与临床相似度大，且成本低，复制方法简单，模型稳定、动物个体差异小、动物死亡率低等特点，是目前CAG动物模型复制的主要方法之一。CAG属中医学“胃痞”等范畴。较为公认的观点认为是本虚标实之证，其中脾虚是CAG的根本病机，决定CAG发生、发展和预后等全部临床过程，因此有必要构建一种脾虚证CAG动物模型，供健脾益气为主要治法治则组方中药的筛选。而中医证侯动物模型的复制要尽量相似于临床脾虚证，需要综合劳倦、寒冷、噪音、生化乏源四个致虚要素，其中耗气破气加饥饱失常模型造模方法最为成功。 

综上所述，MNNG自由饮用是复制CAG大鼠模型、耗气破气加饥饱失常是复制脾虚证大鼠模型较为成熟可行的方法，但上述方法综合应用能否复制出脾虚证慢性萎缩性胃炎胃癌前病变大鼠模型，以及模型时间如何确定，以保证动物处于胃癌前病变期（PLGC，肠上皮化生不典型增生期）目前仍未见报道。此外，鉴于慢性萎缩性胃炎的研究已深入到分子和信号转导水平，如何选择正确的指标从各层次、各指标检测上全面反映脾虚证CAG-PLGC的特征，同样也是需解决的关键问题。 

发明内容

本发明的目的是提供一种脾虚证慢性萎缩性胃炎胃癌前病变动物模型的建立方法，拟采用MNNG自由饮用复制CAG-PLGC动物模型，并在此基础上结合耗气破气加饥饱失常脾虚证动物模型复制方法，建立一种符合慢性萎缩性胃炎致病机理及病程进展，且与中医临床最常见中医辩证分型相似的症证结合的脾虚证慢性萎缩性胃炎胃癌前病变动物模型，该模型重得性和稳定性好，可适用于中医健脾治法治疗慢性萎缩性胃炎的中药的筛选。