[发明专利]生物指示物

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2005年3月22日，申请号为200580009130.0(PCT/GB2005/001056)，发明名称为“生物指示物”。

本发明涉及生物指示物，一般而言，其适于验证一种过程，包括基于热的失活过程和失活步骤，更具体地，其适于验证失活传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathy)(TSE)因子的步骤。

克-雅综合征(Creutzfeldt-Jakob Disease)(CJD)是一种相对罕见的人类神经变性疾病形式，以家族性、散发性或医源性疾病存在，发病率是每百万人群中大约1例。该疾病的一个新的变种形式(vCJD)的出现-其主要发生在年轻人群中并且可能是由于消费了受牛海绵状脑病(BSE)感染的肉类产品，增加了病例数大量增加的概率。这些因素具有重要的公共健康意义。在二十世纪八十年代晚期，高比例的英国人群曾经通过食物潜在地暴露于该疾病。尽管迄今为止的病例数相对低(至2004年2月是149例)，仍然存在着对来自通过其它传播途径，包括手术、移植、输血或污染的医疗用品的所有形式CJD的显著风险。这些途径中的许多涉及该疾病在临床情况中的医源性传播，其它途径在动物模型中得到确定。

在人类中引起所有形式CJD的因子对应用标准方法的失活是高度抵抗的。迫切需要对外科器械除污染的有效方法。已经对多种处理，包括化学处理和利用湿热或干热的高温及高压的应用进行了测试，但是没有一种方法是满足要求的[Taylor，D.M.(1999)于：Principles andpractice of disinfection，preservation and sterilisation中.(Russell，A.D.，Hugo，W.B.and Ayliffe，G.A.J.，Eds)：pp 222-236Blackwell ScientificPublications，Oxford；Taylor，D.M..(2001)Contrib Microbiol.7，58-67；Taylor，D.M.，Fernie，K，Steele，PJ.，McConnell，I.and Somerville，R.A.(2002)J Gen Virol.83，3199-3294]。焚烧是有效的，但是阻碍了对原材料和或器械的任何恢复或再利用。已经显示，高浓度氢氧化钠(高达2M)或高水平次氯酸钠(高达20000ppm)的应用明显降低TSE因子的水平，但是其对外科器械具有损害效应，并且对操作者有害。已经提议了多种其它方法作为失活外科器械上的TSE因子的方法，这些方法目前还 在开发中。这些包括多种气态杀菌剂，包括蒸气态过氧化氢、臭氧和环氧乙烷。已经提议了其它方法作为常规灭菌之前特定的抗TSE预处理，这些方法包括：在限定的pH条件和温度条件下，用热稳定蛋白酶处理外科器械。

嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)芽孢的失活是常规用于验证高压灭菌之正确实施的方法。这种指示物可以给出细菌或病毒被该过程失活的相对指示，以该过程通常由于降低了感染因子水平10⁶个数量级而得到验证。然而，TSE因子独特的稳定性质意味着：需要强得多的指示物来提供对失活这种因子的过程的性能的相对指示。

基于热稳定芽孢或酶制备物的其它生物指示物是熟悉本领域技术人员公知的。这些指示物都有缺点：它们不能验证感染因子活性降低超过10⁶的失活。

TSE因子的失活也是处理受牛海绵状脑病(BSE)感染物质和制备动物来源的原材料中的重要问题。现在存在可靠的科学根据，认为BSE的发生和传播是通过炼油操作中的转变形成的，高度感染的神经组织被通过肉骨粉添加剂(meat-and-bone-meal supplements)反过来喂给牲畜。也有可靠证据表明，BSE是vCJD的病因，几乎确定地是食用污染的牛肉产品的结果。由于这个原因，死于BSE的任何牲畜，以及所有牲畜的脊髓和脑组织，通常从食物链中被去除，并且经可选的途径被处理。其结果是，大量的动物废物目前被积累或经焚烧处理。用热稳定蛋白酶对这些物质进行处理是一个可能的解决方法。此外，存在着对确保任何感染物在适当的过程中被摧毁的验证方法的需求。

本发明的一个目的是，提供可选的和/或改进的生物指示物以及它的应用。