[发明专利]一种检测水样中汞离子浓度的方法

权利要求书

1.一种检测水样中汞离子浓度的方法，包括如下步骤：

(1)将待测水样与溶液B混合后与交联于QCM石英片的金电极上的单链DNA探针A进行杂交，记录QCM石英片的读数a；所述溶液B为含有单链DNA探针B的溶液；所述QCM石英片来自于气相型、采用金电极的石英晶体微天平；

(2)将步骤(1)杂交得到的QCM石英片与交联于纳米金颗粒上的单链DNA探针C进行杂交，记录QCM石英片的读数b；

(3)计算QCM石英片的频率响应；QCM石英片的频率响应＝(a-b)，单位为Hz；

(4)根据QCM石英片的频率响应得出待测溶液中的汞离子浓度；

所述单链DNA探针A包括一个功能区段，即功能区段A；所述功能区段A的长度占单链DNA探针A长度的60％以上；所述功能区段A的长度为6-12bp；所述功能区段A中不含有核苷酸A且核苷酸T占核苷酸总数的75％上；

所述单链DNA探针B包括两个功能区段，即功能区段B1和功能区段B2；所述功能区段B1的长度和所述功能区段B2的长度之和占单链DNA探针B长度的60％以上；所述功能区B1中不含有核苷酸A且核苷酸T占核苷酸总数的75％上；所述功能区段A与所述功能区段B1遵循碱基互补配对原则甲；所述碱基互补配对原则甲中，核苷酸T与核苷酸T互补配对，核苷酸G与核苷酸C互补配对；

所述单链DNA探针C包括一个功能区段，即功能区段C；所述功能区段C的长度占单链DNA探针C长度的60％以上；所述单链DNA探针C的长度为9-20bp；所述功能区段C与所述功能区段B2遵循碱基互补配对原则乙；所述碱基互补配对原则乙中，核苷酸A与核苷酸T互补配对，核苷酸G与核苷酸C互补配对。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述单链DNA探针A的核苷酸序列如序列表的序列1所示，所述单链DNA探针B的核苷酸序列如序列表的序列2所示，所述单链DNA探针C的核苷酸序列如序列表的序列3所示。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述单链DNA探针A的核苷酸序列如序列表的序列4所示，所述单链DNA探针B的核苷酸序列如序列表的序列5所示，所述单链DNA探针C的核苷酸序列如序列表的序列6所示。

4.如权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于：所述单链DNA探针A通过末端的巯基交联于所述QCM石英片的金电极上；所述单链DNA探针C通过末端的巯基交联于所述纳米金颗粒上；所述纳米金颗粒的粒径为12-65nm。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述单链DNA探针A通过如下方法交联于所述QCM石英片的金电极：在所述QCM石英片表面的金电极上滴加10μL溶液A，吸附2h；清洗干燥后加50μL 1mM 6-巯基-1-己醇的乙醇溶液，吸附1h；清洗干燥后得到交联有所述单链DNA探针A的QCM石英片；所述溶液A为含有单链DNA探针A的溶液。

6.如权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：所述单链DNA探针C通过如下方法交联于所述纳米金颗粒上：取200μL所述纳米金颗粒的溶胶加入50μL溶液C，孵育24h；然后加入250μL PBS缓冲液静置48h，离心并洗涤沉淀；最后沉淀分散到250μL PBS缓冲液，得到交联有单链DNA探针C的纳米金颗粒；所述溶液C为含有所述单链DNA探针C的溶液；所述PBS缓冲液优选为如下缓冲液：pH7.4，由Na₂HPO₄、NaH₂PO₄、NaClO₄和水组成，Na₂HPO₄的浓度为10mM，NaH₂PO₄的浓度为10mM，NaClO₄的浓度为0.1M。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述溶液A由所述单链DNA探针A和PBS缓冲液组成，所述单链DNA探针A的浓度优选为20nM-20μM；所述溶液B由所述单链DNA探针B和PBS缓冲液组成，所述单链DNA探针B的浓度优选为20μM；所述溶液C由所述单链DNA探针C和PBS缓冲液组成，所述单链DNA探针C的浓度优选为20μM。