[发明专利]一种易驯食人工饲料鳜鱼相关基因SNP分子标记

说明书

技术领域

本发明属于鱼类分子标记制备技术领域，具体涉及一种与易驯食人工饲料鳜鱼相关基因的SNP分子标记的制备，所述的分子标记可应用于鳜鱼育种基因型的辅助选择。

背景技术

鳜又称鳜鱼(Siniperca chuatsi)是淡水名贵鱼类，隶属于鲈形目鲈亚目，俗称桂花鱼、胖鳜、季花鱼等。翘嘴鳜由于其具有生长速度快等特性，已成为中国鳜养殖中的主养品种，但这种鱼食性奇特，终生以活鱼虾为食，通常情况下绝对拒食死饵或配合饲料，这种现象在鱼类中十分罕见^[1]。鳜商品化养殖历来以投喂活饵进行，鳜鱼苗出膜即以其它种鱼苗为食，因此自然条件下苗种成活率低，生产过程中，苗种培育及其活饵料供应成了其养殖生产迅速大规模发展的两大制约因素。能否使鳜通过人工驯化，转为摄食非活饵，已成为鳜鱼养殖业发展的关键。近年来，我国的鳜鱼人工饲料研究取得了突破性进展，吴遵霖等^[2]在1m³网箱中用配合饲料驯饲鳜鱼幼鱼获得成功，共驯化幼鳜4642尾，存活率达89.6％，饲料系数1.68-1.78。梁旭方等^[3-4]在幼鳜食性驯化取得成功的基础上，又在水库网箱中开展了鲜鱼、鱼块和配合饲料驯饲鳜鱼2龄鱼种(体长17-21cm)的试验，试验亦获得成功，驯化率分别达到100％、100％和88.4％，饲料系数分别为1.6、1.4和2.7，共驯化出鳜鱼2龄鱼种4047尾。配合饲料驯饲成功，只是提供整个养殖过程一个良好的基础和开端。在长期的养殖过程中，我们发现：通过驯养，能逐步诱导部分鳜开始以非活饵为食，即为易驯化鳜；而另一部分鳜则至死都只以新鲜活饵为食，即不易驯化鳜。

在鱼类中，NPY有促进食欲作用与机体的能量平衡状况有关^[5]。鱼类通过外周和下丘脑的摄食调控因子来调控NPY的分泌；当能量处于正平衡时，瘦素和胰岛素分泌增加，使NPY的分泌受到抑制；当能量处于负平衡时，糖皮质激素、刺鼠相关肽(AGRP)、Ghrelin和orexin的分泌增加，它们能启动NPY神经元使NPY分泌增加，从而起促摄食作用。

此外，食欲促进作用与相关特异性受体有关。禁食24-48h的金鱼下丘脑有大量的NPYmRNA表达；而禁食72h后的金鱼大脑的端脑的前视区(telencephalonpre-optic)及丘脑顶盖区域(optic tectum-thalamus regions)亦可找到NPY mRNA表达^[6-7]。金鱼脑室注射(i.c.v)NPY可增加金鱼的摄食量^[8]。同时，将哺乳动物Y1或Y5受体拮抗剂注射入金鱼脑室，可抑制NPY诱导的摄食活动^[9-10]。Narnaware ^[11]等在金鱼脑室注射NPY Y1([31Leu，34Pro]NPY)、Y2(NPY2-36)、及Y5([D-32Trp]NPY)等受体激动剂2h后，Y1及Y5可促进金鱼的摄食活动，而Y2受体对金鱼的摄食活动没有影响。说明金鱼与哺乳动物相似，推测在NPY所有受体中，Y1及Y5被认为是其中枢神经系统介导食欲调控过程中重要的受体^[12-13]。但Aldegunde对虹鳟脑室注射Y1受体激动剂(Leu31，Pro34)-NPY(4μg)、Y2受体激动剂NPY(3-36)(4μg)及Y5受体激动剂(cPP1-7，NPY19-23，Ala31，Aib32，Gln34)-hPP(4μg)后发现，注射Y1受体激动剂的虹鳟增加短期(2h)摄食行为；注射Y2受体激动剂的虹鳟的摄食行为明显增加；但注射Y5受体激动剂的虹鳟完全不受影响。推测在虹鳟中摄食是由Y1及Y2样受体、而非Y5样受体介导。这可能是虹鳟的Y1样及Y2样受体在食欲调节上有协作关系，而在金鱼中这两者是独立作用的。