[发明专利]一种辅助鉴定翦股颖属植物的方法

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技术领域

本发明涉及一种辅助鉴定翦股颖属植物的方法。

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草坪草是一种城市绿化植物，也广泛应用于体育场地、高速公路及河岸堤坡防护、消除污染等方面，体现了巨大的生态效益。草坪草种类繁多，生长环境迥异，按气候条件分类可分为暖季型草坪草和冷季型草坪草，按不同科属分类可分为禾本科虎尾草亚科Poaceae(Gramineae)(7个属)、黍亚科Panicoideae(6个属)、早熟禾亚科Pooideae(12个属)，以及莎草科Cyeraceae(2个属)和豆科及旋花科的一些品种等。翦股颖属(Agrostis L)植物为禾本科早熟禾亚科多年生草本，是世界上最重要的冷季型草坪植物之一，喜冷凉湿润气候，耐寒能力强，绿期长，观赏效果好，广泛用于庭院、公园等地的观赏性草坪，其优良品种用于高尔夫球场果岭区绿化。

在草坪草杂交育种工作中，为了提高杂交育种的效率和成功率，需要选用亲缘关系较近且品质优良的两个品种进行杂交。因此杂交育种的前期工作，就是要明确每个品种的亲缘关联、隶属关系等。长期以来，生物学家主要通过形态学和解剖学证据划分不同的物种，但这些表型特征种类有限，且容易受到环境因素和发育阶段的影响，加之自然选择导致的普遍趋同效应和平行进化因素等，使得物种系统发育关系的判断困难重重。草坪草对环境的忍受力较强，可以在各种环境下生存，长期自然或人工选择的结果，使得自然界中产生了各种各样的草坪草类型，包括各种各样的生态类型、丰富多彩的野生资源等。如果不能高效准确的鉴别草坪草不同的基因型，确认它们之间的亲缘关系，杂交育种的亲本选择就存在一定的盲目性，多样化草坪草基因资源的利用就会受到极大的限制。

基因作为遗传信息的载体，保留了很多进化的痕迹，同一基因在不同物种中的序列差异可以作为分类鉴定的分子标记，具有信息量大、能够稳定遗传等优点。2002年，Frits Goedegebuur利用简并引物于来自22个不同种属的真菌中分离了糖基水解酶12家族的15个新成员，并结合SwissProt等蛋白质数据库中的氨基酸数据，分析了所有已知糖基水解酶12家族的系统发育关系，发现该家族分为四个亚家族，同一亚家族的家族成员分布在同一属中或近似属中。1990年，Woese利用16S rRNA基因构建的系统进化树，在分子水平上将整个生物界分为三个域：古细菌、真细菌和真核生物，有力的支持了三界学说，得到大多数学者的赞同。2003年，刘占林等使用5S rRNA基因序列考察裸子植物的系统发育关系，发现不同裸子植物样本间5S rRNA基因序列平均相似度高达94.4％，而包括小麦、水稻和玉米在内的六种被子植物的5S rRNA基因序列相似度为97.6％，裸子植物与被子植物之间为88.1％，作为原始被子植物的木兰属植物与裸子植物有90.8％的相似性，由此推测出裸子植物和被子植物的进化路径。杨玲玲(2000年)在研究拟诺卡氏菌系统发育关系时，分析了拟诺卡氏菌属内不同种的看家基因gyrB和16SrRNA基因序列，并构建系统进化树，发现gyrB基因的建树效果要优于16SrRNA基因，二者所建进化树拓扑结构相似，但gyrB基因树的分歧度和各分支的自展值更高，说明利用编码蛋白质基因构建物种系统进化树具有较高的分辨率，效果更好。2009年，刘念等人研究南洋杉科系统发育关系时采用了多基因联合建树的方法，利用核18S rRNA和26S rRNA、叶绿体16S rRNA、rbcL、matK和rps4以及线粒体cox1和atp1等8个基因的DNA序列，构建了南洋杉科的分子系统树，确定瓦勒迈杉属与贝壳杉属聚在一支，南洋杉属单独分为一支。