[发明专利]一种测定SDS敏感蛋白酶活力的酶谱方法有效
申请号: | 201110052625.9 | 申请日: | 2011-03-07 |
公开(公告)号: | CN102181515A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 王一明;朱泓;林先贵 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南京土壤研究所 |
主分类号: | C12Q1/37 | 分类号: | C12Q1/37;G01N27/447 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 sds 敏感 蛋白酶 活力 方法 | ||
1.一种测定SDS敏感蛋白酶活力的酶谱方法,包括凝胶配制步骤和电泳步骤,其特征在于电泳用聚丙烯酰胺凝胶由两种不同组分配比的聚丙烯酰胺凝胶组成:
a. 聚丙烯酰胺凝胶I由3质量份丙烯酰胺混合溶液I和1质量份浓缩胶缓冲液组成,其中:
(1)丙烯酰胺混合溶液I由丙烯酰胺、过硫酸铵、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺(TEMED)和超纯水组成,该溶液中丙烯酰胺质量体积比为6.67%、过硫酸铵质量体积比0.133%、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺(TEMED)质量体积比0.133%,pH 6.8;
(2)浓缩胶缓冲液为 0.5 mol/L Tris-HCL溶液,pH 6.8;
b. 聚丙烯酰胺凝胶II由3质量份丙烯酰胺混合溶液II和1质量份分离胶缓冲液组成,其中:
(1)丙烯酰胺混合溶液II由丙烯酰胺、明胶、过硫酸铵、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺(TEMED)和超纯水组成,该溶液中丙烯酰胺质量体积比为13.33%、过硫酸铵质量体积比0.133%、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺(TEMED)质量体积比0.133%、明胶质量体积比0.133%,pH 8.8;
(2)分离胶缓冲液为 1.5 mol/L Tris-HCL溶液,pH 8.8;
c. 上述两种聚丙烯酰胺凝胶分别配制完成后,按照体积比聚丙烯酰胺凝胶I:聚丙烯酰胺凝胶II=2:5,用于制备电泳用聚丙烯酰胺凝胶。
2.根据权利要求1所述的测定SDS敏感蛋白酶活力的酶谱方法,其特征在于电泳缓冲液中含有0.5‰ SDS。
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