[发明专利]一种冬虫夏草菌分生孢子盖片制备及产孢动态计数方法

权利要求书

1.一种计数冬虫夏草菌所产分生孢子的方法，包括如下步骤：

1)在含有至少一个孔的固体培养基上的每个孔处接种冬虫夏草菌，得到接种孔；

2)在步骤1)得到的每个接种孔上方均放置盖玻片，得到盖片平板；

3)培养步骤2)得到的盖片平板培养至长出菌落，每隔一段时间取至少3个盖玻片计数取平均值，得到冬虫夏草菌在不同时间产生的分生孢子数。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

步骤1)中，所述至少一个孔为7个、14个或20个孔；

步骤2)中，所述盖玻片为无菌盖玻片；

步骤3)中，所述每隔一段时间取至少3个盖玻片计数为每隔1天-5天取3-5个盖玻片计数。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

步骤3)中，所述每隔一段时间取至少3个盖玻片计数为每隔1天、3天或5天取3个盖玻片计数。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：

步骤1)中，每1L所述固体培养基按照如下方法制备：(20.0-50.0)克麦麸、(10.0-20.0)克葡萄糖、(2.0-5.0)克蛋白胨、(1.0-3.0)克酵母提取物、200克土豆、(15.0-20.0)克琼脂和水混合，用水补至1L；

每1L所述固体培养基具体按照如下方法制备：50.0克麦麸、20.0克葡萄糖、5.0克蛋白胨、3.0克酵母提取物、200克土豆、18.0克琼脂和水混合，用水补至1L；

步骤3)中，所述培养温度为15℃-20℃，所述培养为静置暗培养，所述培养时间为8天-15天。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

步骤3)中，所述培养温度为15℃、18℃或20℃，所述培养时间为8天、10天或15天，所述计数采用显微镜观察计数。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：

在步骤1)前，还包括在固体培养基上打孔的步骤；所述孔的直径为3mm-5mm，所述孔的直径具体为5mm。

7.权利要求1-6中任一所述的方法在绘制冬虫夏草产分生孢子的动态曲线中的应用。