[发明专利]一种复合乳酸菌发酵果茶的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种以苹果、山楂、胡萝卜为原料，采用复合乳酸菌发酵技术，生产发酵果茶的制备方法，尤其涉及一种复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。

(二)背景技术

随着现代生活节奏的加快、工作压力的加大，人类免疫系统功能显著降低，导致各类疾病的发病率呈上升趋势。通过提高机体免疫力来降低疾病的发病率，是预防和治疗疾病的有效途径之一。乳酸菌胞外多糖是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外常渗于培养基的一类糖类化合物，有的依附于微生物细胞壁形成荚膜，称为荚膜多糖；有的进入培养基形成粘液，称为粘液多糖，它们都是微生物适应环境的产物。

果茶是人们日常经常饮用的饮料之一，大都以各种蔬菜水果为原料，经过合理配伍、打浆、稳定剂调整状态、酸味剂和甜味剂调整口味后而制成，虽然具有一定的营养价值但缺乏保健功能。

国内外的科技工作者对乳酸菌的保健作用的研究表明，乳酸菌的代谢产物可以调节胃肠道菌群平衡，增强机体免疫力，抑制肿瘤，降低血清胆固醇，促进人体消化等多项生理功能，这些研究成果为如何充分利用乳酸菌的保健功能提供了理论依据。本发明提供了一种以苹果、山楂、胡萝卜混合浆料为发酵底物，接种直投式复合乳酸菌发酵剂，制备复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。

(三)发明内容

本发明目的在于提供一种以苹果、山楂、胡萝卜为原料，采用复合乳酸菌发酵技术，制备复合乳酸菌发酵果茶的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：本发明中所涉及的百分比除另有注明之外为质量比，本发明的产品采用这样的方法来制备的：

1.发酵菌株的选择及培养基的制备

A菌——乳酸乳球菌乳脂亚种CICC 20408，Lactococcus lactis subsp.cremoris。

培养基为：酵母浸膏7.5克，蛋白胨7.5克，葡萄糖10克，磷酸二氢钾2克，番茄汁100毫升，吐温80 0.5毫升，水900毫升，pH7.0。

B菌——副干酪乳杆菌CICC 20246，Lactobacillus paracasei。

C菌——短乳杆菌CICC 6239，Lactobacillus brevis。

D菌——嗜酸乳杆菌CICC 22150，Lactobacillus acidophilus。

B菌、C菌、D菌培养基均为：酪蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸二胺2.0g，Tween 80 1.0g，K₂HPO₄ 2.0g，MgSO₄.7H₂O 0.2g，MnSO₄.H₂O 0.05g，CaCO₃ 20.0g，蒸馏水1.0L，pH6.8。

2.发酵菌种的制备过程

2.1冻干菌粉末的活化

分别量取0.9％的生理盐水10ml于4只试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃，将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9％的生理盐水中，震荡使其溶解，在30℃恒温箱中静止活化30分钟，备用。

2.2发酵菌种扩大培养

2.2.1一级发酵种子的制备

分别量取4株发酵菌培养基各200ml于4只500ml三角瓶内，121℃灭菌20分钟冷却至30℃，按培养基体积的10％接种2.1步骤中已经活化的菌种，在30℃静止培养18小时，作为一级发酵种子。

2.2.2生产发酵剂的制备

分别向4株发酵菌培养基中加入3％的液态甘油、2％低聚果糖、3％蔗糖，121℃灭菌20分钟冷却至30℃，分别按5％体积比例接种一级发酵种子，30℃静止培养18小时，分别检测活菌数，各生产发酵剂活菌数≥10⁹个/ml，视同为发酵成熟，如果活菌数＜10⁹个/ml，继续培养，直至达到10⁹个/ml。

2.3粉末冻干菌种的制备

将成熟的生产发酵剂直投菌种在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入-30℃冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥。

2.4直投式发酵剂的复配

按冻干菌粉末重量，取A菌粉末3-5份，B菌粉末1-3份，C菌粉末2-4份，D菌粉末2-4份充分混匀后真空包装即可用于苹果、山楂、胡萝卜果茶的发酵，加菌量按投料重量的0.012％添加。