[发明专利]利用HBHA来检测肺结核和由结核分枝杆菌引起的感染

权利要求书

1.天然形式的HBHA和天然形式的ESAT-6在制备用于在体外检测和区分表现潜伏性结核的哺乳动物和表现活动性结核的哺乳动物或用于鉴定在健康的群体内表现潜伏性结核的哺乳动物的标记物中的应用，所述检测和区分或者所述鉴定通过如下步骤获得：

a)从所述的哺乳动物中获得生物样品；

b)在允许IFN-γ的分泌的条件下，以独立的方式，将所述的生物样品与天然形式的HBHA和ESAT-6相接触；

c)测定HBHA特异性IFN-γ分泌和ESAT-6特异性IFN-γ分泌；以及

d)计算HBHA特异性IFN-γ分泌和ESAT-6特异性IFN-γ分泌之间的比，

其中在来自表现潜伏性结核的哺乳动物或未被结核分枝杆菌感染的哺乳动物的样品中获得的分泌比值大于1，而在来自表现活动性结核的哺乳动物的样品中获得的分泌比值小于1。

2.根据权利要求1的应用，其中在来自表现潜伏性结核的哺乳动物或未被结核分枝杆菌感染的哺乳动物的样品中获得的分泌比值在100到400的范围内。

3.根据权利要求1所述的应用，其中在来自表现活动性结核的哺乳动物的样品中获得的分泌比值小于0.5。

4.根据权利要求1～3中任何一项所述的应用，其中生物样品选自由以下成分组成的组：支气管吸出物；支气管气肺泡灌洗液(BAL)；胃洗出液；痰；渗出液例如肋膜的、腹的和关节的液体；脑脊髓液；头脊柱液；关节液；腹水；心包液及其它体液；淋巴结活组织；经支气管的活组织；肋膜和肝脏的活组织；髓质穿刺和腰椎穿刺；尿或血样；和脓液吸出的样品。

5.根据权利要求1～4中任何一项所述的应用，其中步骤b)包含以独立的方式将天然形式的HBHA和ESAT-6与PBMC相接触。

6.根据权利要求1～5中任何一项所述的应用，其包含先于步骤b)的培养生物样品的附加步骤。

7.一种用于检测和区分表现潜伏性结核的哺乳动物和表现活动性结核的哺乳动物或用于鉴定在健康的群体内表现潜伏性结核的哺乳动物的试剂盒，所述的试剂盒包含：

·天然形式的HBHA和ESAT-6；

·组成用于以独立的方式将存在于来自所述的哺乳动物的生物样品中的细胞与天然形式的HBHA和ESAT-6相接触的介质所需要的试剂；以及

·用于检测接触之后IFN-γ分泌的试剂。

8.天然形式的HBHA或重组体形式的HBHA在制备用于在体外检测和区分表现潜伏性结核的哺乳动物和表现活动性结核的哺乳动物或用于鉴定在健康的群体内表现潜伏性结核的哺乳动物的标记物中的应用，所述检测和区分或者所述鉴定通过如下步骤获得：

a)从所述的哺乳动物的局部感染部位获得生物样品；

b)在允许获得对IFN-γ的影响的条件下，将所述的生物样品与天然形式的HBHA或重组体形式的HBHA相接触；以及

c)通过如下步骤测定所述哺乳动物的状态：

c1)在将细胞与天然的或重组体形式的HBHA接触之后检测IFN-γ的分泌量，其中在表现活动性结核的哺乳动物中HBHA特异性IFN-γ的分泌量要大于1000pg/ml，而在未被结核分枝杆菌感染的哺乳动物或表现潜伏性结核的哺乳动物中HBHA特异性IFN-γ的分泌量要小于1000pg/ml；

或者

c2)在淋巴细胞群或其子群内将所述细胞与HBHA相接触之后，计算包含胞浆内IFN-γ的细胞的比例，其中在表现活动性结核的哺乳动物中包含胞浆内IFN-γ的细胞的比例大于0.3％，而在未被结核分枝杆菌感染的哺乳动物或表现潜伏性结核的哺乳动物中包含胞浆内IFN-γ的细胞的比例小于0.3％。

9.根据权利要求8所述的应用，其中由来自表现活动性结核的哺乳动物的生物样品所分泌的HBHA特异性IFN-γ的量要大于5000pg/ml。

10.根据权利要求8所述的应用，其中由来自未被结核分枝杆菌感染的哺乳动物或表现潜伏性结核的哺乳动物的生物样品所分泌的HBHA特异性IFN-γ的量要小于100pg/ml。

11.根据权利要求8所述的应用，其中由来自表现活动性结核的哺乳动物的生物样品所获得的细胞的所述比例大于0.5％。