[发明专利]改良的鸡白介素2蛋白及其制备方法

权利要求书

1.改良的鸡白介素2蛋白，其特征在于：其氨基酸序列为序列表中<400>3所示的序列，由121个氨基酸残基组成，该蛋白具有天然的鸡白介素2蛋白的生物活性。

2.根据权利要求1所述的改良的鸡白介素2蛋白经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有天然的鸡白介素2蛋白活性的由ChIL-2/A蛋白的衍生蛋白质。

3.根据权利要求1或2所述的改良的鸡白介素2蛋白，其特征在于：为了使该改良的鸡白介素2蛋白或其衍生蛋白质分泌到细胞周质或培养基中，可在所述蛋白质的N端连接上信号肽序列。

4.根据权利要求1或2所述的改良的鸡白介素2蛋白，其特征在于：为了使该改良的鸡白介素2蛋白或其衍生蛋白质便于纯化，可在氨基酸残基序列组成的蛋白质的N端或C端连接上标签，所述标签为Poly-Arg、Poly-His、FLAG、Strep-tag II或c-myc。

5.一种编码权利要求1所述改良的鸡白介素2蛋白的优化基因，其特征在于：所述优化基因的核苷酸序列为序列表中<400>1所示的序列。

6.根据权利要求5所述的改良的鸡白介素2蛋白的优化基因，其特征在于：是在严格条件下杂交且编码改良的鸡白介素2蛋白的核酸序列，所述严格条件为在0.1×SSPE或0.1×SSC以及0.1％S DS的溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜。

7.含有权利要求5所述改良的鸡白介素2蛋白的优化基因的重组表达载体和重组表达细胞。

8.一种权利要求1所述改良的鸡白介素2蛋白的制备方法，其特征在于：将所述蛋白的优化基因插入到表达载体中，得到含有该蛋白优化基因的重组表达载体，然后将该重组表达载体导入宿主细胞，筛选得到含有重组表达载体的阳性重组细胞，发酵培养该重组细胞，表达得到所述蛋白。

9.根据权利要求8所述改良的鸡白介素2蛋白的制备方法，其特征在于：所述表达载体为pBV220、pET载体、pQE载体或pPIC9K，所述宿主细胞为大肠杆菌DH5α、TB1或BL21(DE3)。

10.根据权利要求8所述改良的鸡白介素2蛋白的制备方法，其特征在于：所述表达为诱导表达，诱导物为异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷，诱导浓度为1mmol/L，诱导表达时间为3-5小时。