[发明专利]一株以亚硝酸盐为氮源的好氧反硝化细菌及其筛选方法

权利要求书

1.一株以亚硝酸盐为氮源的好氧反硝化细菌，其特征在于它为假单胞杆菌(Pseudomonas sp.)yy7，属于假单胞菌属(Pseudomonas)，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC No：M 2011157，保藏日期为2011年01月20日。

2.筛选以亚硝酸盐为氮源的好氧反硝化细菌的方法，其特征在于以亚硝酸盐为氮源的好氧反硝化细菌的筛选方法按以下步骤实现：一、取哈尔滨污水厂A²/O工艺的好氧段污泥5mL接种到60mL的LB液体培养基中，在温度为25℃、120r/min的好氧条件下恒温振荡培养24h后得污泥富集培养液；二、采用倍比稀释法将污泥富集培养液进行梯度稀释，并涂于固体选择性培养基上，放于恒温箱中在25℃条件下培养120h，获得单一菌落，然后接种至15mL的LB液体培养基中，在温度为25℃、120r/min的好氧条件下恒温振荡扩大培养48h；三、取扩大培养后菌液1mL接种到20mL液体选择性培养基中，在温度为25℃、150r/min的好氧条件下培养36h，然后以液体选择性培养基中NO₂^--N的去除效率作为指标进行筛选，选取NO₂^--N去除效率高于80％的菌液，经分离、纯化后，获得一株具有好氧反硝化功能的菌株，即完成以亚硝酸盐为氮源的好氧反硝化细菌的筛选；

其中步骤二中固体选择性培养基每L由0.1g的NaNO₂、0.5g的KH₂PO₄、0.05g的FeCl₂·6H₂O、0.02g的CaCl₂、0.5g的MgSO₄·7H₂O、0.3g的乙酸钠、2g的琼脂、1mL的微量元素液和余量的水组成，pH值为7.2～7.5，115℃高压灭菌25min，所述微量元素液每L由3g的FeSO₄·7H₂O、0.01g的H₃BO₃、0.01g的Na₂MoO₄·2H₂O、0.02g的MnSO₄·H₂O、0.01g的CuSO₄·5H₂O、0.01g的ZnSO₄、0.5g的EDTA和余量的水组成；

步骤三中液体选择性培养基每L由0.1g的NaNO₂、0.5g的KH₂PO₄、0.05g的FeCl₂·6H₂O、0.02g的CaCl₂、0.5g的MgSO₄·7H₂O、0.3g的乙酸钠、1mL的微量元素液和余量的水组成，pH值为7.2～7.5，115℃高压灭菌25min，所述微量元素液每L由3g的FeSO₄·7H₂O、0.01g的H₃BO₃、0.01g的Na₂MoO₄·2H₂O、0.02g的MnSO₄·H₂O、0.01g的CuSO₄·5H₂O、0.01g的ZnSO₄、0.5g的EDTA和余量的水组成。