[发明专利]ANGPTL4作为血清学检测肝癌转移的标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤学和诊断领域。更具体地，本发明涉及一种可用于检测肝癌转移的血清标记物及其用途。

背景技术

ANGPTL4基因(最初该基因被发明人的实验室命名为pp1158)[朱洪新等，中华肿瘤杂志(2002)24(2)：123-125]就是利用此功能筛选技术平台从人胎盘cDNA文库中克隆到的新基因，该基因cDNA全长为1943bp，开放阅读框含1218bp，编码406个氨基酸，预计分子量为45.2kDa。N端有一疏水信号肽和卷曲(Coiled-Coil)结构域，C端有一纤维蛋白原样(Fibrinogen-like)结构域。并于2000年首先将该基因(原基因名为pp1158)的cDNA序列在GenBank上登录(登录号为AF202636)。现已同Yoon等克隆的PGAR[Mol.Cell.Biol.，Jul 2000；20：5343-5349]和Kim等克隆的HFARP[Biochem.J，2000，346：603-610]由HUGO统一正式命名为ANGPTL4(angiopoietin-like 4)。

ANGPTL4在肿瘤转移中的作用越来越引起人们的关注。目前的研究表明ANGPTL4对肿瘤转移的影响是非常复杂的，在不同的肿瘤中有不同的作用：对Lewis肺癌细胞和黑色素瘤细胞B16F0的研究表明ANGPTL4能够通过对血管和肿瘤细胞的双重影响，即改变血管的渗透及肿瘤细胞的运动和侵润能力，来抑制肿瘤细胞的转移。与此相反，在乳腺癌的最新研究表明，TGFβ1在乳腺癌中诱导ANGPTL4的上调，乳腺癌细胞分泌的ANGPTL4能够破坏内皮细胞之间的连接，增加肺毛细管的渗透性，促进肿瘤细胞的跨血管内皮细胞的迁移，与TGFβ1共同启动了乳腺癌的肺转移。

原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国最常见恶性肿瘤之一，占居民肿瘤死亡第二位。肝癌出现症状时多属中晚期，切除后复发、转移率高。因此，肝癌(包括癌症转移)的早期诊断对延长患者的生存时间和降低肝癌死亡率具有重要意义。

目前肝癌的诊断主要依靠影像学检查、肝穿刺组织学检查等方法，然而这些检测方法均具有一定的局限性。例如即使是很好的细针穿刺仍因取材有限而有较高的假阴性率，并且有使肿瘤扩散和针道种植的危险。癌症的血清学检测技术一直是研究的重点。然而，目前现有的针对癌症(如HCC)检测尚缺乏令人满意的血清标志物，更缺乏可用于检测或判断肝癌转移的血清标志物。

因此，本领域迫切需要开发可用于检测或判断肝癌转移的血清特异标志物。

发明内容

本发明的目的就是提供一种可用于检测或判断肝癌转移的血清特异标志物。

在本发明的第一方面，提供了血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)或其特异性抗体的用途，它们被(a)用于制备检测肝癌转移的诊断试剂或试剂盒；和/或(b)用于制备血清检测肝癌的诊断试剂或试剂盒。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4蛋白或其特异性抗体偶联有或带有可检测标记。

在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

在另一优选例中，所述诊断试剂是单克隆抗体。

在另一优选例中，所述的特异性抗体是单克隆抗体。

在另一优选例中，所述的检测肝癌转移是血清检测。

在另一优选例中，所述的血清检测是ELISA法、或双抗夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA法)。

在本发明的第二方面，提供了一种用于检测肝癌转移的诊断试剂盒，所述的试剂盒含有一容器，所述容器中含有ANGPTL4蛋白或其特异性抗体；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于检测或诊断肝癌转移。

在另一优选例中，所述的标签或说明书中注明以下内容：

(i)如果检测对象的血清ANGPTL4浓度高于93.5ng/ml，则该对象发生肝癌的几率大于正常人群；和/或

(ii)如果检测对象的血清ANGPTL4浓度高于130ng/ml，则该对象发生肝癌转移的几率大于正常人群(或一般肝癌患者)。

在另一优选例中，所述肝癌包括肝细胞肝癌，尤其是原发性肝细胞肝癌。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4蛋白或其特异性抗体偶联有或带有可检测标记。

在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

在另一优选例中，所述的抗体是单克隆抗体。