[发明专利]诊断G6PD缺乏症的核酸杂交膜条、PCR引物及试剂盒

权利要求书

1.一种用于诊断葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的核酸杂交膜条，其特征在于：包括基底，以及在所述基底上固定有特异性的突变检测探针，每一条所述突变检测探针分别对应一个葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点，所述葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点为cDNA95、cDNA392、cDNA487、cDNA493、cDNA592、cDNA871、cDNA1004、cDNA1024、cDNA1376、cDNA1381、cDNA1387、cDNA1388中的至少一个；每一条所述突变检测探针包含15-20个碱基的序列，在所述序列的中部位置包含其相对应的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的突变碱基。

2.根据权利要求1所述的核酸杂交膜条，其特征在于：所述突变检测探针为SEQ ID NO.1~ SEQ ID NO.12中的至少一个序列或其反向互补序列的DNA。

3.根据权利要求1或2所述的核酸杂交膜条，其特征在于：所述基底上还固定有正常对照探针，其与所述突变检测探针固定在所述基底的不同位置上。

4.根据权利要求3所述的核酸杂交膜条，其特征在于：所述正常对照探针为SEQ ID NO.13~ SEQ ID NO.21中的至少一个序列或其反向互补序列的DNA。

5.根据权利要求4所述的核酸杂交膜条，其特征在于：每一个所述正常对照探针都对应至少一个所述葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点，其中，SEQ ID NO.13对应的基因突变位点为cDNA95，SEQ ID NO.14对应的基因突变位点为cDNA392，SEQ ID NO.15对应的基因突变位点为cDNA487和 cDNA493，SEQ ID NO.16对应的基因突变位点为cDNA592 ，SEQ ID NO.17对应的基因突变位点为cDNA871，SEQ ID NO.18对应的基因突变位点为cDNA1004，SEQ ID NO.19对应的基因突变位点为cDNA1024， SEQ ID NO.20对应的基因突变位点为cDNA1376和cDNA1381，SEQ ID NO.21对应的基因突变位点为cDNA1387和cDNA1388。

6.根据权利要求5所述的核酸杂交膜条，其特征在于：所述突变检测探针和/或正常对照探针的3’或5’端带有氨基标记。

7.一种用于扩增待检样品基因片段的PCR引物，其特征在于：所述PCR引物的扩增产物含有权利要求1所述的基因突变位点，所述PCR引物为以下5对中的至少一对：SEQ ID NO.22和EQ ID NO.23；SEQ ID NO.24和SEQ ID NO.25；SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27；SEQ ID NO.28和SEQ ID NO.29；SEQ ID NO.30和SEQ ID NO.31；其中SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30是上游引物；SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31是下游引物。

8.根据权利要求7所述的PCR引物，其特征在于：所述的扩增产物分别包括如下位点：引物GF1和引物GR1的扩增产物包含cDNA95位点；引物GF2和引物GR2的扩增产物包含cDNA392位点；引物GF3和引物GR3的扩增产物包含cDNA487、cDNA493、cDNA592位点；引物GF4和引物GR4的扩增产物包含cDNA871、cDNA1004、cDNA1024位点；引物GF5和引物GR5的扩增产物包含cDNA1376、cDNA1381、cDNA1387、cDNA1388位点。

9.根据权利要求7或8所述的PCR引物，其特征在于：所述上游引物和/或下游引物的5’端带有生物素或荧光标记。

10.一种用于诊断葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的试剂盒，其特征在于：包含权利要求1所述的用于诊断葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的核酸杂交膜条，以及含有权利要求7所述的用于扩增待检样品基因片段的PCR引物的PCR反应液。