[发明专利]一种生物标志抗体芯片、其制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白质芯片领域，具体涉及一种生物标志抗体芯片、其制备方法及其应用。

背景技术

抗体芯片(Antibody Microarray)是蛋白质芯片的一种主要类型，最新发展的抗体芯片技术的原理类似于常规的酶联免疫反应，即将特异性抗体或抗原固定在载体上，待测样本按一定的比例稀释后与载体上的抗体或抗原进行反应，再加入荧光标记的抗体或抗原，通过激光共聚焦扫描仪或CCD相机读取荧光强度，由计算机软件对荧光信号进行分析，得到准确的定性结果或定量数据。因为在抗体芯片上可分布成千上万的抗体或抗原，因此可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，从而极大促进蛋白质组的研究和利用。

抗体芯片主要受制于如下技术关键：

1、样本点样条件的优化；

2、微阵列载体选择及其表面化学修饰；

3、芯片设计和分析系统；

4、样本制备，处理和检测技术。

因此，现有技术中的抗体芯片一般设计不合理，而且未很好的解决抗体芯片生产过程中点样条件，载体处理和修饰，抗体固定以及样本处理等关键环节，故产品检测的通量小，产品不稳定，特异性不高且可靠性也不强，另外由于涵盖量少，很易产生假阳性或假阴性。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种生物标志抗体芯片、其制备方法及其应用。

一种生物标志抗体芯片，将相关生物标志抗体集中在载玻片大小的载体上。

所述生物标志抗体芯片为前列腺癌抗体芯片。

所述载体为利用纳米技术进行化学修饰的载体。

所述的生物标志抗体芯片进一步包括阳性和阴性对照。

所述生物标志抗体芯片的制备方法，具体包括：抗体芯片的设计与验证；载玻片的处理；载玻片的化学修饰；抗体稀释液的制备、抗体的预处理和质检；微阵列点样仪的设置，预冷和试点样；微阵列点样抗体芯片；抗体芯片的封闭和固定；抗体芯片的质量控制，包装和入库。

所述对载玻片的化学修饰包括在载玻片表面偶联活性基团、构建三维聚合物涂层并利用分子自组装技术形成单分子膜。

所述抗体的质检包括特异性抗原、细胞系和组织的检测。

所述微阵列点样抗体芯片采用拉丁方实验设计。

所述的生物标志抗体芯片的制备方法还包括多模型交互验证统计策略。

所述生物标志抗体芯片的应用。

本发明提供的生物标志抗体芯片克服了抗体芯片产业化过程中的技术瓶颈，解决了样品点样弥散，不均一；载体的处理和化学修饰不理想而致抗体无法长期保存以及活性不稳定；检测特异性不高、实用性不强；芯片设计和数据分析落后等常见问题。与非生物标志抗体芯片相比，检测通量更高，灵敏度更好，往往一个产品可检测超过1300个的抗体。由于本发明提供的生物标志抗体芯片采用了特有的载体和化学修饰，使得检测的背景更小，特异性更高。利用本发明提供的样本处理试剂盒和检测试剂盒，使得操作更简便，检测更容易。

附图说明

图1示出了根据本发明的生物标志抗体芯片的制备方法；

图2示出了根据本发明的前列腺癌等肿瘤生物标志抗体芯片检测工艺流程图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步的详细描述。

根据本发明的生物标志抗体芯片将相关生物标志抗体集中在载玻片大小的载体上，可以利用血清或血浆样品进行检测，使得无创伤性、大规模、快速、准确的早期诊断成为可能，同时也疾病的个体化治疗和预后提供及时和准确的参考。

本发明的生物标志抗体芯片的基本原理包括：按照使用目的的不同，在载玻片大小的载体上点布相同或不同种类的抗体，然后再与标记了荧光染料的样本中的蛋白质结合，经扫描仪读出荧光强弱，计算机分析检测结果。该方法具有一次性检测样本巨大、相对低消耗、计算机自动分析结果以及敏感度，特异性高和快速、准确等特点。

根据本发明的生物标志抗体芯片适用样本范围广，既可用于冰冻组织，也可用于蜡块组织和血清等各种体液。随同产品提供的蛋白抽提试剂以及标记溶液，洗脱溶液和检测溶液保证了检测的低背景，高灵敏度。同时也维持了样本制备过程中的完整性和一致性。

根据本发明的生物标志抗体芯片专门设置了阳性和阴性对照，从而保证了检测结果的可靠性，避免了假阳性或假阴性。整个操作可在几个小时内完成，方法简单，可操作性高。