[发明专利]血吸虫虫卵的孵化方法及其所用的孵化袋

说明书

技术领域

本发明涉及动物虫卵的孵化方法，尤其涉及一种血吸虫虫卵的孵化方法及其所用的孵化袋。

背景技术

日本血吸虫是一种严重的人畜共患寄生虫病，家畜、尤其是生活在疫区的家畜是主要的传染源。人与家畜血吸虫病的普查方法有多种，但最普遍、最准确的方法是采用粪便检查的方法。粪便检查血吸虫病也是当前病原检查的主要方法之一。粪便检查血吸虫的方法主要依靠粪便毛蚴孵化法，粪便毛蚴孵化法仍是当前可以作出正确诊断的检测方法，也是国家考核达标验收时规定的检测方法。该方法的操作程序分为四步骤：1.铜筛过滤；2.滤出物以尼龙筛绢淘洗；3.加入沉淀杯，沉淀换水，除去上浮物；4.倒入三角烧瓶或长颈烧瓶中进行孵化，为便于观察毛蚴，还要在瓶颈下1/2处加一块2-3cm的脱脂棉，再加清水至瓶口。这种方法通常称为常规尼龙筛绢淘洗粪便毛蚴孵化法，由于该方法既经过铜筛网过滤，又经过尼龙筛绢淘洗，粪渣清晰，孵出毛蚴易于观察，但是由于要经过铜筛网过滤，尼龙筛绢淘洗等多步骤，每一步骤均要散失一些虫卵。根据无锡血防所以16份阳性粪便进行试验，共检出毛蚴数1998只，其中沉淀内为1171只，仅占58.6％，而倒去的残杂却孵出毛蚴827只，占总数的38.1％，其他换水等散失占3.3％。这种孵化的方法的缺点是：(1)对低感染度人群或动物的敏感性低；(2)虫卵丢失多，计数不准确；(3)步骤多，耗时长。为此，有必要发展更灵敏、快捷的方法。

直接粪便毛蚴孵化法检测家畜血吸虫病，其操作方法上减少铜筛过滤、尼龙筛绢淘洗过滤这两个过程，将粪便直接倒入三角烧瓶或长颈烧瓶中进行孵化。有实验证实75克血吸虫病阳性牛粪采用直接粪便毛蚴孵化法与常规尼龙筛绢淘洗法进行对比试验，结果常规尼龙筛绢法孵出毛蚴22个，而直接粪便淘洗法仅孵出毛蚴2个，12小时后，前者换水重新孵化，已没有发现毛蚴，后者换水后分瓶孵化，却仍然出现大量毛蚴，说明许多虫卵尚未孵出毛蚴。第二次同样方法以50克粪便进行对比试验，常规尼龙筛绢法孵出毛蚴146个，而直接粪便毛蚴孵化法为101个，同样12小时后换水分瓶孵化，前者仍然没有孵出毛蚴，而后者依然有毛蚴孵出。常规尼龙筛绢淘洗粪便毛蚴孵化法，由于该方法既经过铜筛网过滤，又经过尼龙筛绢淘洗，粪渣清晰，所有毛蚴均能孵出，效果较直接粪便毛蚴孵化法好。

发明内容

本发明要解决现有的粪便毛蚴孵化法检测步骤繁琐、敏感性低、准确性差的技术问题，提供一种血吸虫虫卵的孵化方法，该方法不仅操作简便、耗时少，而且可批量操作，且灵敏度高、准确性好。

此外，还需要提供一种上述血吸虫虫卵的孵化方法所用的孵化袋。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：

在本发明的一个方面，提供了一种血吸虫虫卵的孵化方法，包括以下步骤：

将待检粪样加入孵化袋后封口，该孵化袋具有100～500目孔径的微孔；

把装有待检粪样的孵化袋放入清洗装置中清洗、甩干，以去除待检粪样中部分杂质与色素，并保留血吸虫虫卵；

将清洗完的孵化袋放入孵化杯，加入孵化水孵化。

优选的，所述孵化袋的孔径为300～350目，因为300～350目的孵化袋能有效阻挡血吸虫虫卵通过，而孵化出的血吸虫毛蚴又易于钻出孵化袋，达到很好的孵化效果。

所述孵化袋的材质包括尼龙筛绢、涤纶筛绢、丙纶纤维或维纶纤维。优选的，本发明的孵化袋选用尼龙筛绢袋。

优选的，清洗所用水的温度不超过16℃，因为降低水体温度至16℃及以下后清洗孵化袋内虫卵时可抑制虫卵孵化，防止在清洗过程中因虫卵孵化成毛蚴而流失，提高检测的准确率。

优选的，清洗所用水的盐浓度大于等于0.5％，因为增加水体中盐的含量可增加孵化所需时间，0.5％及以上盐浓度水清洗孵化袋内虫卵时可抑制虫卵孵化，从而防止在清洗过程中因虫卵孵化成毛蚴而流失，提高检测的准确率。

优选的，所述清洗、甩干的次数为四次以上，可以将待检粪样清洗干净，提高毛蚴孵化率。

优选的，所述孵化的温度为26℃，26℃是最适孵化温度。

在本发明的另一方面，提供了一种用于血吸虫虫卵孵化的孵化袋，该孵化袋具有100～500目孔径的微孔。

优选的，所述孵化袋设有自封条，便于封口。

本发明血吸虫虫卵的孵化方法，每一个样品在一个尼龙筛绢袋中完成待检物的过滤和孵化，减少了操作步骤和虫卵损失，提高了检测敏感性，同时由于可以进行自动化操作，本发明方法检测速度明显提高，适于血吸虫病疫区家畜的大规模检测。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。