[发明专利]灵芝酸T酰胺衍生物TLTO-A及其合成及应用

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种生物医药技术领域的化合物及其制备和应用方法，具体是一种灵芝酸T酰胺衍生物TLTO-A及其合成及应用。

背景技术

癌症是严重危害人类生命和健康的疾病，其死亡率仅次于心脑血管疾病，并且它的发生率呈逐年上升的趋势。因此抗癌药物的研究在生命科学领域意义重大，而且极富挑战性。开发新颖、高效、低毒、特异性强的新型抗肿瘤药是抗癌药物研究的重要任务。

三萜是一类重要的次级代谢产物，广泛存在于植物和高等真菌中。很多研究已经报道三萜类化合物具有很好的抗肿瘤活性，可以抑制肿瘤细胞生长，以及诱导肿瘤细胞的凋亡等等。灵芝(Ganoderma lucidum)为担子菌纲、多孔菌科、灵芝属真菌，自古以来就是我国名贵药用真菌，已经有几千年的应用历史。现代医学研究表明，其中主要的活性成分之一就是三萜类物质。

灵芝酸T是四环三萜，属于高度氧化的羊毛甾烷衍生物。我们实验室通过两阶段发酵培养的方法可以高效的进行生产(Biotechnology Progress，18，51-54，2002)。进一步的药理实验证明灵芝酸T具有很好的抗肿瘤活性。灵芝酸T可以通过线粒体途径诱导肺癌细胞95-D凋亡(Life Science，80，205-211，2006)，另外，体外和体内实验也证明其可以通过抑制MMPs蛋白的表达来抑制肿瘤细胞的转移(Pharmacology Report，62，157-170，2010)。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提供一种灵芝酸T酰胺衍生物TLTO-A及其合成及应用，以灵芝酸T为先导化合物，对其进行结构改造，得到了具有更好的抗肿瘤活性的酰胺衍生物TLTO-A，一方面得到新颖高效，具有更好选择性的三萜类抗癌化合物，另一方面对灵芝酸的结构与活性的关系进行初步探索，对抗癌药物的开发具有重要意义。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及一种灵芝酸T酰胺衍生物TLTO-A，其化学名称(22S，24E)-3α，15α，22-triacetoxy-5α-lanosta-7，9(11)，24-trien-26-oic acid amide，化学结构式为：

本发明涉及上述灵芝酸T酰胺衍生物的制备路线如下：

其具体步骤为：将灵芝酸T溶解于二氯甲烷中，冰浴降温且搅拌的环境下滴加草酰氯，滴加完毕后至室温，然后持续通入干燥的氨气，使氨气与过量的草酰氯反应完全，最后加入水终止反应并采用乙酸乙酯进行搅拌萃取得到灵芝酸T酰胺衍生物。

本发明涉及上述灵芝酸T酰胺衍生物TLTO-A的应用，用于制备抑制人宫颈癌细胞株HeLa、人高转移肺癌细胞株95D以及人肝癌细胞株HepG2的药物。

经过体外活性测试表明，该化合物对人宫颈癌细胞株HeLa，人高转移肺癌细胞株95D，人肝癌细胞株HepG2的生长和增殖具有明显的抑制作用，进一步实验以HeLa细胞为例，证明其可以诱导的肿瘤细胞的凋亡，因此是一种潜在的抗肿瘤药物，具有良好的应用前景。

附图说明

图1为TLTO-A和羟基喜树碱对HeLa细胞存活率的影响示意图。

图2为TLTO-A对肿瘤细胞HeLa细胞周期的作用示意图。

图3为TLTO-A诱导肿瘤细胞HeLa细胞凋亡的作用示意图。

图4为TLTO-A降低肿瘤细胞HeLa线粒体膜电位的作用示意图。

图5为TLTO-A激活肿瘤细胞HeLa caspase-3和caspase-9活性的作用示意图。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1

TLTO-A的合成与分离