[发明专利]酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法

权利要求书

1.一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：所述方法包括如下工艺步骤：

步骤一：以海豹油甘油三酯为原料，经脂肪酶选择性酶解并分离纯化，得到高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸；

步骤二：将步骤一得到的高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸作为原料，加入溶血磷脂酰胆碱，在酶非水相催化作用下，得到磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸产品。

2.根据权利要求1所述的一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：步骤二中所述的酶为脂肪酶、磷脂酶A1或磷脂酶A2。

3. 根据权利要求1所述的一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：步骤一的具体方法为：在反应容器中加入海豹油5-6克和PH为7-8的缓冲液5-6mL，再加入800-1000U/ mL脂肪酶，在20-40℃条件下搅拌酶解8-10小时，用0.2-0.4mol/L氢氧化钠乙醇溶液开展相分离，除去甘油二酯，获得的游离脂肪酸相，取4-6 g尿素和25-35 mL乙醇加入一圆底烧瓶中，放入60-65℃水浴中，搅拌直至溶液澄清，迅速倒入盛有游离脂肪酸相的烧杯中，边搅拌边冷却至室温，置于冰箱中-35度结晶，将结晶混合物迅速抽滤，得结晶包合物和滤液两部分，滤液经过除杂纯化，可获得高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸。

4. 根据权利要求3所述的一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：步骤一中所述的脂肪酶由圆柱形假丝酵母菌、荧光假单胞菌、黑曲霉菌 、白地霉无根菌 、巢子须霉德氏根霉菌 、毛霉菌、绵毛状腐质霉菌或圆弧青霉菌产生。

5. 根据权利要求3所述的一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。

6. 根据权利要求1所述的一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：步骤二的具体方法为：在反应容器中加入步骤一制得的高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸0.5-0.7克，然后再加入溶血磷脂酰胆碱0.1-0.2克、正己烷3-5mL、1-2克酶，反应温度在30-50℃条件下，搅拌10-20小时，然后过滤，再将滤液在60℃减压蒸馏，将3-5mL丙酮加入到剩下的溶液中，过滤，将沉淀物在真空干燥箱中干燥得到反应产物。