[发明专利]一种复合微生物菌剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

随着生物技术的不断发展，微生物菌剂大量地在环保、养殖和种植领域使用。上世纪八十年代初，日本琉球大学比嘉照夫教授率先发明了以醋酸母菌、乳酸菌、光合细菌、放线菌等10个属80多种微生物组合而成的复合微生态制剂EM(有效微生物菌群)。EM在日本、巴西、美国等地推广应用获得了很大的成功。

虽然EM效果好，但是仍然存在着一些因素，使其不能够在我国大力推广。首先，在经济上，高昂的菌种引进费使大部分效益拱手于国外、成本难以下降；其次，在质量技术上，80多种微生物混合在一起，一方面使企业难以准确地鉴别区分，制约产业化的发展，另一方面工序极为复杂，稍有不慎可能导致有效菌种的死亡。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种组合科学简单、适于产业化生产的复合微生物菌剂。

本发明的另一目的在于提供上述复合微生物菌剂的制备方法。

技术方案：为了达到发明目的，本发明是这样来实现的：一种复合微生物菌剂，包括以下重量份数的组分：

肠膜明串株菌         80～200份

深红红螺菌           40～100份。

其中，复合微生物菌剂中总菌数≥2×10⁸/ml。

制备上述复合微生物菌剂的方法，包括以下步骤：

(1)进行放大培养：

将肠膜明串株菌经斜面活化，接种于液体培养基中，28～35℃条件下培养36～72h；

将深红红螺菌经斜面活化，接种于液体培养基中，28～35℃条件下培养36～72h；

计算活菌，检测肠膜明串株菌和深红红螺菌的菌数，按比例将菌液混合；

(2)25～35℃固体发酵36～72h，30～35℃烘干，粉碎，过筛。

为了保证微生物菌剂的细度，上述步骤(2)优先选择40目筛。

有益效果：本发明采用两种微生物菌为原料，相比日本的EM大大减少了用菌数，在不影响效果的前提下，方便了企业能够在产业化过程中准确鉴别，极大地减少了成本。由于微生物新陈代谢周期短，对周围环境也没有任何污染，适合环保、养殖和种植产业使用。

具体实施方式

实施例1：

(1)分别进行放大培养：

将肠膜明串株菌经斜面活化后，接种于液体培养基中，28℃培养72h，液体培养基配方：葡萄糖3％，胰胨1.5％，牛肉膏3％，蛋白胨2％，吐温800.1％，醋酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.25％，pH6.5。

将深红红螺菌经斜面活化，接种于液体培养基中，28℃培养72h，液体培养基配方：氯化铵0.1％，醋酸钠3.5％，氯化镁0.01％，氯化钙0.01％，磷酸二氢钾0.06％，磷酸氢二钾0.04％，酵母膏0.01％，pH6.0。

活菌计数，检测肠膜明串株菌的菌数和深红红螺菌的菌数，按重量份数将其混合：80份肠膜明串株菌和40份深红红螺菌。

(2)固体发酵罐中加入米糠73％，麸皮10％，大豆粉7％，奶粉8％，微量元素1％，121℃灭菌30min，待罐温降至40℃以下，在发酵罐旋转的情况下喷入混合菌液，35℃固体发酵36h，粉碎，过40目筛，备用。活菌计数，总菌数≥2×10⁸/ml装袋。

实施例2：

(1)分别进行放大培养：

将肠膜明串株菌经斜面活化后，接种于液体培养基中，32℃培养48h，液体培养基配方：葡萄糖3％，胰胨1.5％，牛肉膏3％，蛋白胨2％，吐温800.1％，醋酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.25％，pH6.5。

将深红红螺菌经斜面活化，接种于液体培养基中，32℃培养48h，液体培养基配方：氯化铵0.1％，醋酸钠3.5％，氯化镁0.01％，氯化钙0.01％，磷酸二氢钾0.06％，磷酸氢二钾0.04％，酵母膏0.01％，pH6.0。

活菌计数，检测肠膜明串株菌的菌数和深红红螺菌的菌数，按重量份数将其混合：150份肠膜明串株菌和75份深红红螺菌。

(2)固体发酵罐中加入米糠73％，麸皮10％，大豆粉7％，奶粉8％，微量元素1％，121℃灭菌30min，待罐温降至40℃以下，在发酵罐旋转的情况下喷入混合菌液，30℃固体发酵48h，粉碎，过40目筛，备用。活菌计数，总菌数≥2×10⁸/ml装袋。

实施例3：

(1)分别进行放大培养：