[发明专利]呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于由样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸样垫和PVC支撑板组成，在PVC支撑板上依次紧密粘附有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸样垫。所述样品垫为玻璃纤维；所述胶体金垫为胶体金标记的AMOZ衍生物多克隆抗体聚酯膜；所述硝酸纤维素膜上依次包被有检测线(T线)和质控线(C线)，其中检测线(T线)上包被了AMOZ衍生物偶联载体蛋白，质控线(C线)上包被了羊抗兔IgG抗体；所述吸样垫为吸水纸。

2.一种权利要求1所述的呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的AMOZ衍生物偶联载体蛋白为AMOZ衍生物偶联牛血清白蛋白或卵清白蛋白；所述的AMOZ衍生物多克隆抗体由AMOZ衍生物偶联载体蛋白作为免疫原免疫白兔获得。

3.一种权利要求1所述的呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的胶体金是由氯金酸(HAuCl₄)在还原剂枸橼酸三钠作用下制成大小为20-40nm的胶体金颗粒。

4.一种权利要求1所述的呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的胶体金垫的制备方法为：取颗粒大小为20-40nm的胶体金溶液，用0.2mol/L K₂CO₃将胶体金溶液的pH值调至7.0-9.0，室温放置30分钟；在上述溶液中加入AMOZ衍生物多克隆抗体，使AMOZ衍生物多克隆抗体的浓度为10-40μg/ml胶体金，混合均匀后，室温放置30分钟；然后加入10-80μl/ml胶体金的10％的牛血清白蛋白(BSA)溶液，混合均匀，室温放置10分钟；上述溶液于12000转离心30分钟，仔细吸取上清液，弃去，剩余的沉淀用30-70％初始胶体金体积的胶体金复溶液溶解，得到AMOZ衍生物多克隆抗体-胶体金标记物；将AMOZ衍生物多克隆抗体-胶体金标记物按15-35μl/cm²的比例均匀的铺在聚酯膜上，放入45℃干燥箱干燥2.5-3小时，制成胶体金垫。

5.一种权利要求1所述的呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的胶体金复溶液为含0.30％的Tris，5％蔗糖，0.50％PVP，0.30％Casein-Na，pH值7.0-9.0的溶液。

6.一种权利要求1所述的呋喃它酮代谢物检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的硝酸纤维素膜上T、C线的包被方法为：将NC膜粘贴在PVC板上，吸水纸贴到PVC板上压住膜1-1.5mm。打开划膜仪，按清洗键清洗划膜仪，设置划膜仪参数为C线1.0μl/cm，T线1.0μl/cm；将贴好的PVC板放在划膜仪上，用C、T线包被液在NC膜上分别划C、T线。划膜不合格的用红记号笔标出，将包被板置干燥箱设置45℃，干燥1-1.5小时。其中，T线包被液为0.8-3.5mg/ml的AMOZ衍生物偶联载体蛋白；C线包被液为0.6-2.0mg/ml的羊抗兔IgG抗体。