[发明专利]表达马链球菌兽疫亚种类M蛋白的重组猪痘病毒载体疫苗

说明书

一、技术领域

本发明属于生物制品领域。本发明涉及一种重组猪痘病毒载体疫苗，具体而言，涉及一种表达马链球菌兽疫亚种(SEZ)类M蛋白(SzP)的重组猪痘病毒(rSPV-SzP)载体疫苗，该疫苗能提供针对SEZ的免疫保护作用，及减少养猪业的经济损失。

二、背景技术

马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp zooepidemicus SEZ)是我国猪链球菌病的重要病原之一，同时也是一种重要的人畜共患病病原。其引发的猪链球菌病曾在我国华南、西南和华东等地区广泛流行，给我国养猪业造成较大的危害，猪链球菌病也是严重危害世界养猪业的一种重要的细菌性传染病，并可引起人类的感染。

类M蛋白(M-Like Protein)是马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp zooepidemicus SEZ)细胞壁表面一种纤丝状表面蛋白，是该菌重要的毒力因子和保护性抗原(Timoney J F，Walker J，Zhou M，et al.Cloning and sequence analysis of a protective M-like gene from streptococcus equi subsp.Zooepidemicus.Infect，Immune，1995，63：1440-1445)。马链球菌兽疫亚种类M蛋白(SzP)高度抗酸，具有多种生物学功能(Timoney JF，Arliushin SC，Boschwitz JS.Comparison of the sequences and functions of Streptococcus equi M-like protein Sem and SzPse.Infect Immun，1997，65(9)：3600～3605)。其表面有调理素表位，能刺激机体产生抗调理素抗体(Timoney JF，Mukhtar M.Varability in the M proteins of the equine strains of Streptococcus equi subsp zooepidemicus，P.15～20In W.Plowright，P D Rossdale，and J F Wade(ed)，Equine Infectious diseases VI，Cambridge 1991，R&W Publications，Newmarket，England)；能抑制补体C3b在菌体表面沉积，从而抑制机体补体系统的活化(Boschwitz JS，Timoney JF.Inhibition of C3 deposition of Streptococcus equi by M protein：a mechanism for survival in equine blood.Infect Immun，1994，62：3515～3520)；能结合机体的纤维蛋白原，使其具有抗吞噬细胞的吞噬活性(Boschwitz JS，Timoney JF.Characterization of the antiphagocytic activity of equine fibrinogen for Streptococcus.zooepidemicus.Microb Pathog，1994，17：121～129)。类M蛋白与SEZ致病性和机体的免疫保护作用密切相关，一直是研制链球菌疫苗的焦点。

重组痘病毒载体疫苗已经有近30年的安全应用，作为表达载体，痘病毒有许多特有的优点：(1)冻干疫苗较稳定、费用低、容易进行生产和使用。(2)疫苗有多种用药途径，包括口服，尤其是针对野生动物进行免疫预防时。(3)痘病毒作为基因重组活疫苗的载体，不需佐剂即可免疫动物，病毒在体内增殖过程中产生的外源蛋白可刺激机体产生免疫应答，不仅诱导机体产生体液免疫，而且诱导很强的细胞免疫。接种一次就能获得长期的免疫效果，能诱导抗外来抗原的抗体和细胞毒性T细胞反应。(4)基因组容易组装，允许大片段的基因丢失或删除，以及外源DNA的插入.(5)重组痘病毒疫苗能区分天然感染和接种的动物并与之兼容。(6)与其它哺乳动物病毒表达载体相比，被表达的外源蛋白在感染细胞中能忠实地进行修饰具有较高的表达效率。通过对动物接种重组痘病毒的办法，能了解外源蛋白对个体的作用以及机体的免疫应答。

应用重组痘病毒已经成功地表达了来源于动植物，乃至人类的许多种基因。表达抗原基因的重组痘病毒作为基因重组疫苗。