[发明专利]紫草素作为抗真菌药物增效剂的用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是紫草素作为抗真菌药物增效剂的新用途。

背景技术

唑类(包括咪唑类、三唑类)及多烯类等抗真菌药物是临床上常用的能有效治疗深部及浅表部真菌感染的抗真菌药，如咪唑类中的酮康唑、克霉唑、咪康唑、益康唑等；三唑类中的氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑等；多烯类中的两性霉素B等。但由于众所周知的原因，临床上的耐药菌株越来越普遍，致使不得不加大用药剂量，某些抗真菌药物甚至加大用药量也无效。加大用药剂量必然会增加毒副作用，尤其如酮康唑等对肝脏或心脏有毒副作用的药物，从而限制了这些药物在临床上的应用。

紫草素(shikonin)，又名5，8-二羟基-2-[(1R)-1-羟基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1，4-二酮，来源于紫草科植物紫草的根，其结构如式(I)所示。

药理实验表明，紫草素具有多种生物学活性，如抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗生育、抗甲状腺低下、降血糖及保肝护肝等。但至今未见紫草素可作为唑类或多烯类等抗真菌药物增效剂的报道。

发明内容

本发明的目的是对紫草素提供一种作为抗真菌药物增效剂的新用途。所说的抗真菌药物是唑类或多烯类等抗真菌药物，紫草素的用量为在抗真菌药物有效浓度中加入1～16μg/ml，优选用量为2μg/ml～4μg/ml。例如，在每毫升含氟康唑、酮康唑、咪康唑或两性霉素B0.0125～0.5微克的液体制剂中，加入紫草素1～16微克；或者在每毫克含氟康唑、酮康唑、咪康唑或两性霉素B 0.0125～0.5微克的固体制剂中加入紫草素1～16微克。

经实验证明，当抗真菌药物与紫草素合用时，紫草素能降低抗真菌药物的用药剂量，不仅能在减少抗真菌药物用药量的情况下同样确保其对浅表部或深部真菌感染的治疗效果，而且对于临床分离的耐药性菌株或实验室诱导的耐药性菌株均具有明显的增效作用，还能使已被认为治疗无效的抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用。因此紫草素可用作抗真菌药物的增效剂，用于不同深部或浅表真菌感染的治疗。

本发明为紫草素开辟了一种新用途，作为抗真菌药物的增效剂，可降低唑类或多烯类抗真菌药物的用药剂量，从而减轻了药物的毒副作用，特别是氟康唑、酮康唑、咪康唑及两性霉素B等。尤其是紫草素作为抗真菌药物的增效剂，使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用，有效治疗真菌感染特别是耐药性真菌感染，具有重要的临床应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围不限于实施例。

实施例1：紫草素和氟康唑合用对不同临床真菌株的作用。

材料和方法

1.试药：

紫草素：中国药品生物制品检定所(下同)。

氟康唑：辉瑞制药有限公司(下同)。

二甲亚砜：中国医药(集团)上海化学试剂公司。

紫草素的浓度为8mg/ml，氟康唑的浓度为2mg/ml，受试药物于-20℃保存。实验前，将药物贮存液取出置35℃温箱融化，充分混匀，分别进行药效学试验。

2.菌株：

白念珠菌、克柔氏念珠菌和羊毛状小孢子菌临床株，由上海长海医院真菌室提供，均经形态学和生化学鉴定。

所有实验用菌株均于沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化，于35℃培养1周后，分别挑取单克隆再次划板活化，取第二次所得单克隆置SDA斜面，用上述方法培养后于4℃保存备用。

3.培养液：

RPMI 1640培养液：RPMI 1640(Gibco BRL公司)10.0g，NaHCO₃ 2.0g，吗啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g，加三蒸水900ml溶解，1N NaOH调pH至7.0，定容至1000ml，滤过消毒，4℃保存。

沙堡葡萄糖琼脂(SDA)培养基：蛋白胨10g，葡萄糖40g，琼脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，调整pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后4℃保存。

YEPD培养液：酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，定容至1000ml，高压灭菌后4℃保存。

4.仪器：

隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)；

THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗器械厂)；

511型酶标分析仪(上海第三分析仪器厂)；

5.菌液制备：

(1)念珠菌菌液