[发明专利]一种天然植物来源的总黄酮的制备方法

权利要求书

1.一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）原料处理：将红花芒毛苣苔药材切成1～2cm的小段；

2）破碎提取：将切段的药材放入破碎提取容器中，每次用50％～80％的含水乙醇做溶剂破碎提取1-2次，若药材重量为1kg则含水乙醇的用量为6～10升，破碎提取时间每次2～5 min，抽滤，合并滤液；

3）闪蒸浓缩：将滤液在水浴温度60℃～90℃，真空度为0.090 Mpa -0.095Mpa，进液流速为200～350 mL·min^-1的条件下进行真空薄膜浓缩，回收乙醇，得到浓缩液，1mL浓缩液含1g-2g药材；

4）大孔树脂纯化：将得到的浓缩液通过大孔吸附树脂分离富集，色谱柱的径高比为1:10～1:15，先用H₂O洗脱，再依次用10%～80%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，洗脱流速为5～15 mL·min^-1，分别收集4倍柱体积的各部位洗脱液，收集合并20%～70%含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液在50℃～80℃、真空度为0.090 Mpa～0.095 Mpa、进液流速为250～350 mL·min^-1的条件下进行真空薄膜浓缩、干燥，即得红花芒毛苣苔总黄酮提取物干粉。

2.如权利要求1所述的一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于步骤2）中：含水乙醇的浓度为55％～75％，优选60％～70％；破碎提取时间每次3～4 min。

3.如权利要求1所述的一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于步骤3）中：水浴温度为65℃～85℃，优选70℃～80℃；进液流速为230～320 mL·min^-1，优选250～300 mL·min^-1。

4.如权利要求1所述的一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于步骤4）中：色谱柱的径高比为1:12～1:13；洗脱流速为8～13 mL·min^-1，优选洗脱流速为10～12 mL·min^-1；真空薄膜浓缩的温度为65℃～70℃，进液流速为280～300 mL·min^-1。

5.如权利要求1所述的一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于步骤4）中：先用H₂O洗脱，再依次用10%含水乙醇、20%含水乙醇、40%含水乙醇、60%含水乙醇、75%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集4倍柱体积的各部位洗脱液，收集合并20%含水乙醇、40%含水乙醇和60%含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液真空薄膜浓缩、干燥。

6.如权利要求1所述的一种天然植物来源的总黄酮的制备方法，其特征在于步骤4）中：先用H₂O洗脱，再依次用10%含水乙醇、30%含水乙醇、50%含水乙醇、70%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集4倍柱体积的各部位洗脱液，收集合并30%含水乙醇、50%含水乙醇、70%含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液真空薄膜浓缩、干燥。