[发明专利]纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY的制备方法及其制剂

说明书

技术领域

本发明涉及牛乳房炎的治疗技术，尤其涉及到一种纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY的制备方法以其制剂。

背景技术

牛乳房炎是奶牛最常见的、也是对奶牛业生产危害最大的一种疾病。这种疾病会造成奶牛乳腺发炎肿胀，使产奶量大幅下降。据世界卫生组织(WHO)统计数字显示，这种疾病使美国制奶业每年损失大约20亿美元，使英国每年损失也达2亿美元以上。由于中国正处于奶牛业高速发展期，相关技术、措施和设施还不配套和完善，因此，乳房炎所造成的损失就更加严重，每年高达上百亿元，沉重打击了中国奶牛业的发展。

急性乳房炎会直接造成牛乳的废弃、上乳量减少、牛乳价值降低、兽医诊疗费和药费及劳动量增加等经济损失；隐性乳房炎则因其感染率特别高(一般奶牛场的感染率在30～50％)，所造成的损失也不可轻视，尢其对产乳量会有很大影响，以10头牛规模的小奶牛场计算，每年产乳量就将减少3825kg，同时，还有饲料和人工等的间接损失。而且，乳房炎病牛经治愈后，其产奶量不会很快恢复，吃进的饲料不能转换成奶汁，有的乳头甚至因此变“瞎”，不出乳，带来的经济损失就更大。

目前，治疗奶乳房炎普遍采用的是抗生素疗法。由于大剂量地使用青霉素、链霉素、四环素和金霉素等药物，会造成牛乳中抗生素大量残留。一方面由于牛乳中有抗生素残留，接种乳酸菌后不易繁殖，使乳酸生成受阻，极大地影响酸乳制品的生产；另一方面当人们食用这种含大量抗生素的牛乳后，会引起多种过敏反应，甚至发生过敏性休克，如果长期饮用，还会使机体内的细菌产生耐药性，一旦发生感染性疾病，将给医治带来很大困难，甚至无药可救。

更为严重的是：滥用抗生素的结果，造成目前常用的抗生素对奶牛场广泛传播的致病菌已大部分失效，使隐性乳房炎和慢性乳房炎病例越来越多；特别是大量使用抗生素之后形成的L-型变种耐药致病菌，既使施用再多抗生素，它仍会隐藏在乳房内生存和繁殖，慢性感染乳腺，使乳房炎反复发作。另外，抗生素会杀灭有益菌，从而影响乳房内正常菌群平衡，破坏机体天然免疫屏障，给有害菌大开方便之门。这些都是造成牛乳房炎无法根治，并且不断蔓延的根本原因。

为了消除抗生素应用所带来的负面影响，减少和杜绝耐药致病菌株的出现和传播，世界卫生组织呼吁各国采取紧急措施。美国、英国等许多国家都制定了相应的政策严格限制抗生素的使用。根据欧盟第70/524号令的精神，传统抗生素将在很短时间内被逐一取消，并将在2006年后全部禁作饲用。世界其它各国为与国际接轨，也都相应制订了一系列新法规。

因此，研发一种安全有效的防治牛乳房炎的新方法，开发并应用既无药残，又无污染，又能提高飬经济效益的治疗牛乳房炎的抗生素替代品，是全球奶牛饲养业发展的大方向和迫切需求。

发明内容

针对现有技术中牛乳房炎影响严重、且无法根治的问题，本发明要提供一种抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合Ig及其制剂。

本发明首先提供一种纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(S1)筛选引致牛乳房炎的代表性耐药致病菌作为病原体，所述耐药致病菌包括无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及白色念珠菌中的至少两种；

(S2)将所述耐药致病菌混合、粉碎处理后，加入福氏佐剂，再高速匀化处理形成油包水乳液，即制得耐药致病菌蛋白复合抗原；

(S3)采用淘汰法筛选具有高免疫应答能力的选择产蛋禽类，再拣取被选出之产蛋禽类所产的免疫蛋；

(S4)对所述免疫蛋进行消毒，取蛋黄，制得抗牛乳房炎耐药致病菌特异性IgY粗品；

(S5)将所述IgY粗品进一步纯化处理，制得抗牛乳房炎耐药致病菌特异性IgY纯品干粉；

(S6)对所述IgY纯品干粉作纳米化处理，制得纳米化抗牛乳房炎耐药致病菌特异性IgY纯品干粉；

(S7)对所述纳米化抗牛乳房炎耐药致病菌特异性IgY纯品干粉作脂质体化处理，制得纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY。

本发明还提供一种纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY制剂，其中包括前述方法制备的纳米脂质体抗牛乳房炎耐药致病菌特异性复合IgY，还包括针剂或乳膏辅料。