[发明专利]作为多聚(ADP-核糖)聚合酶抑制剂的被取代的6-环己基烷基取代的2-喹啉酮和2-喹喔啉酮

说明书

本申请是申请号为200480036656.3，申请日为2004年11月18日的中国专利申请的分案申请。 

技术领域

本发明涉及PARP的抑制剂、并提供化合物和包含该化合物的组合物。另外，本发明提供所述PARP抑制剂用作例如药物的用法。

背景技术

细胞核酶多聚(ADP-核糖)聚合酶-1(PARP-1)为包括PARP-1和几种最近鉴定的新颖多聚(ADP-核糖基化)酶的PARP酶家族的成员。PARP还被称为多聚(腺苷5′-二磷酸-核糖)聚合酶或PARS(多聚(ADP-核糖)合成酶)。

PARP-1为116kDa的包括三个结构域的主要核内蛋白：包含两个锌指状结构的N-端DNA结合域、自身修饰域和C-端催化域。其存在于几乎所有的真核生物中。该酶合成多聚(ADP-核糖)，其是可由超过200个ADP-核糖单元组成的支链聚合物。多聚(ADP-核糖)的蛋白质受体直接或间接地参与保持DNA的完整性。它们包括组蛋白、拓扑异构酶、DNA和RNA聚合酶、DNA连接酶、和Ca²⁺和Mg²⁺依赖性核酸内切酶。PARP蛋白在许多组织中以高水平表达，最值得注意的是在免疫系统、心、脑、和生殖系细胞中。在正常的生理条件下，具有最小的PARP活性。然而，DNA损伤引起高达500倍的PARP的立即活化。

归因于PARP特别是PARP-1的许多功能之一，在于其通过ADP-核糖基化促进DNA修复并因此协调许多DNA修复蛋白的重要作用。由于PARP活化，NAD⁺水平显著下降。广泛的PARP活化引起遭受大规模DNA损伤的细胞中NAD⁺的严重耗竭。多聚(ADP-核糖)的短半衰期产生迅速的周转率。一旦多聚(ADP-核糖)形成，其迅速被结构活性多聚(ADP-核糖)糖水解酶(PARG)连同磷酸二酯酶和(ADP-核糖)蛋白裂解酶所降解。PARP和PARG形成将大量NAD⁺转化为ADP-核糖的循环。在不到一小时的时间内，PARP的过度兴奋引起NAD⁺和ATP下降到少于正常水平的20％。这种情况在氧气剥夺已经强烈地危害细胞能量输出的缺血过程中是特别有害的。随后的在再灌注过程中自由 基的产生被假定为是组织损伤的主要原因。在缺血和再灌注过程中在许多器官中通常出现的ATP下降的原因部分可归因于由于多聚(ADP-核糖)周转的NAD⁺耗竭。因此，期望PARP或PARG抑制以保持细胞的能量水平，从而加强缺血组织在损伤后的存活性。

多聚(ADP-核糖)合成还参与炎性反应所必需的许多基因的诱导表达。PARP抑制剂抑制巨噬细胞中的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮细胞中的P型选择蛋白和细胞间粘着分子-1(ICAM-1)的产生。这种活性构成由PARP抑制剂表现出来的强抗炎作用的基础。PARP抑制能够通过防止嗜中性粒细胞到受损组织的易位和渗入而减少坏死。

PARP由受损的DNA片段活化，并且一旦活化，其催化高达100个ADP-核糖单元对多种核内蛋白(包括组蛋白和PARP本身)的附着。在主要的细胞应激反应过程中，广泛的PARP活化可以通过能量储存的耗竭而迅速引起细胞损伤或死亡。由于每个再生的NAD⁺分子消耗四分子的ATP，NAD⁺由于大规模的PARP活化而耗尽，在NAD⁺再合成的努力中，ATP也可被耗竭。

已经有报导说PARP活化在NMDA-和NO-诱导的神经毒性中起到关键作用。这已经在其中毒性的预防与PARP抑制效价直接相关的皮层培养物中和海马切片中得以证实。因此，PARP抑制剂在神经变性痰病和头外伤治疗中的可能作用得到认可，虽然尚未阐明其确切的作用机理。

类似地，已经证明单次注射PARP抑制剂减少兔的由心或骨骼肌的缺血和再灌注所引起的梗塞面积。在这些研究中，在闭塞之前一分钟或再灌注之前一分钟单次注射3-氨基-苯甲酰胺(10mg/kg)引起心脏中梗塞面积的类似缩小(32-42％)，而另一种PARP抑制剂1，5-二羟基异喹啉(1mg/kg)以可比的程度缩小梗塞面积(38-48％)。这些结果使得有理由假定PARP抑制剂可以预先抢救缺血心脏或骨骼肌组织的再灌注损伤。