[发明专利]采用大孔树脂吸附提取肾茶有效部位的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肾茶有效部位的提取分离方法，具体为大孔树脂吸附提取分离高含量肾茶有效部位的工艺方法，属中药领域。

背景技术

肾茶是一种珍贵的药用保健植物，是一种传统的民间用药，民间应用其治疗急慢性肾炎、尿路感染、尿路结石、风湿性关节炎等疾病，同时肾茶还具有抗菌、消炎、增加肝肾脾血流量等功能。其有效部位为内含的迷迭香酸与黄酮类化合物。目前肾茶有效部位提取方法主要有水提法和醇提法，分离方法包括肾茶上柱液的制备步骤、由特定分离物质构成的分离柱进行分离的步骤、由特定的洗脱剂对分离柱进行洗脱的步骤以及对洗脱液进行浓缩等步骤，现有技术的上述分离柱一般采用硅胶柱，但采用硅胶柱进行分离、层析的基本上是单组份物质，且洗脱剂多采用有机溶剂(如苯、三氯甲烷等)，毒副作用较大，损害操作人员的身体健康，因此，现有的分离提取方法不宜于工业生产，可以作为化学成分的研究手段。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种采用大孔树脂吸附提取肾茶有效部位的工艺方法。本发明提取的有效部位含量高，迷迭香酸与总黄酮的含量达到50％以上，达到五类中药原料药标准；且所用的洗脱剂无毒性，适用于工业化生产。

为了达成上述目的，本发明的解决方案是：

一种采用大孔树脂吸附提取肾茶有效部位的工艺方法，包括以下步骤：1)肾茶的提取；2)上柱液的制备；3)由大孔吸附树脂分离柱进行分离、用不同极性乙醇水溶液作为洗脱剂对分离柱进行洗脱；

4)洗脱液的浓缩。

所述的肾茶的提取包括如下工艺步骤：1)肾茶采用肾茶质量10-20倍的水煮沸得到的滤液即为肾茶提取液；2)将肾茶提取液合并、过滤、减压浓缩至膏状浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到粗品提取物。

所述的沉淀蛋白质用的醇采用浓度为50％-95％乙醇，体积是肾茶提取液体积的1-2倍；得到的粗品提取物是水提醇沉获得的提取物。

所述的肾茶质量10-20倍的水采用肾茶质量10-20倍乙醇水溶液替换。

所述的乙醇水溶液浓度为50％-95％。

所述的上柱液的制备是指将肾茶的提取步骤中得到的粗品提取物溶液配制成0.1g/ml的上柱液。

所述的由大孔吸附树脂分离柱进行分离、用不同极性乙醇水溶液作为洗脱剂对分离柱进行洗脱的步骤为：先用水对大孔吸附树脂柱进行洗脱至水洗脱液无色；然后采用浓度20-40％的乙醇水溶液洗脱，再用浓度40-70％的乙醇水溶液洗脱，最后用浓度70-95％的乙醇水溶液洗脱。

所述的浓度20-40％的乙醇水溶液洗脱后收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到提取物质量；溶解后定容；将浓度40-70％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到提取物质量；溶解后定容；将浓度70-95％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到提取物质量；溶解后定容；三次洗脱得到的提取物即为肾茶有效部位的提取物。

本发明的有益效果为：肾茶上柱液采用水、水提醇沉、醇提而制成，前者为水提，后者涉及醇提法。本发明的分离方法在浓度20-70％的洗脱液浓缩后形成的浸膏中，有效部位含量高，迷迭香酸与总黄酮的含量达到50％以上，达到五类中药原料药标准。而且本发明所用的洗脱剂无毒性，适用于工业化生产。因此，本发明为提纯、生产肾茶五类中药原料药提供了高效、可行且可以进行工业化生产的方法，为进一步进行肾茶制剂研究打下了基础。

具体实施方式

实施例1

取肾茶50克，用肾茶质量10-20倍的水溶液煮沸2-5次，每次进行60-240分钟，将每次所得的滤液合并，减压浓缩至膏状，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到粗提取物的质量；再将得到的粗提取物溶解配制成0.1g/ml的溶液作为肾茶的上柱液。

将大孔树脂在浓度95％的医用乙醇中浸泡过夜，然后用浓度95％的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液蒸干至无残渣，再用去离子水洗脱至流出液无醇味、无混浊。

将上述制备好的上柱液直接上柱。

首先用水对大孔吸附树脂柱进行洗脱至无色，然后采用浓度20-40％、40-70％、70-95％的乙醇水溶液洗脱，洗脱体积为树脂体积的4-10倍，收集洗脱液，减压浓缩至膏状，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到洗脱物质量，溶解定容。分别测定浓度20-40％、40-70％、70-95％的乙醇水溶液洗脱物中迷迭香酸与总黄酮的含量，结果如表1所示。

实施例2