[发明专利]一种抗体组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种抗体组合物及其应用，特别涉及可用于制备肾移植急性排斥反应诊断和鉴别诊断试剂的抗体组合物及其应用。

背景技术

肾脏移植是治疗终末期肾病最理想的肾脏替代疗法。随着移植手术技术的进步和新型免疫抑制剂的应用，肾移植术后人和肾的存活率都有了很大的提高，但肾移植后的排斥反应仍然是影响肾移植预后的主要因素，并与移植肾和移植受者的长期存活率明显相关。

排斥反应的诊断主要依靠肾组织病理活检，然而目前的病理活检还存在很多问题，首先它是有创性检查，不可避免存在活检相关并发症(如出血、移植物破裂)的危险，无法在短期内反复检查，也无法在门诊动态观察随访，而且随着移植术后的时间延长，为了监测移植受者的免疫状态的变化，需要定期的程序活检，但活检的费用和移植受者的接受程度也制约活检的开展；其次目前的移植病理缺乏敏感的手段发现早期的急性排斥，诊断往往是在出现明显的移植物损伤后，不能早期指导临床医生抗排斥治疗；第三病理检查较难预测抗排斥治疗的反应，不能有效预测移植物的长期存活；另外活检标本还存在代表性问题，穿刺局部的组织有时候并不能很好的代表整个移植物的状态。

正是由于目前的病理活检还无法满足临床医生的要求，寻求无创性检查来辅助移植物功能监测，对病理活检进行补充，尿液检查无疑是监测移植肾功能较好的选择，近年来尿蛋白组学研究发现正常尿蛋白除了30％来自血浆蛋白，其余70％均来自肾脏本身，能够很好的反映肾脏的病理生理过程，在生理性和病理性刺激下，肾小球和肾小管相应作出反应，引起尿蛋白排出的变化。

如果通过尿液就可以无创性诊断移植肾排斥并区分排斥类型，从而取代病理活检将具有极大的应用前景，已有一些较少样本的研究显示了尿液细胞因子检测诊断急性排斥的可能。本发明人对67例急性排斥和119例肾功能稳定者的尿液细胞因子的分析的前期结果显示，Fractalkine诊断急性排斥的敏感性和特异性分别为82.1％和76.5％(Peng WH et al，Kidney International 2008 74，1454-1460)。Granzyme B诊断急性排斥的敏感性和特异性分别为59.7％和91.6％。Hu等(American Journal of Transplantation 2004；4：432-437)研究针对44例急性肾功能障碍(28例急性排斥，10例急性肾小管坏死和6例BK病毒肾病)，20例慢性移植肾排斥，26例肾功能稳定的尿液Mig测定分析显示，Mig区分急性肾功能障碍和慢性排斥、肾功能稳定者的敏感性和特异性分别为79.5％和93.5％。Hu等(Transplantation2009；87：1814-1820)后来的研究同样证实尿液Mig诊断移植肾肾损伤(包括急性排斥，急性肾小管坏死，BK病毒肾病和慢性移植肾肾病)的敏感性和特异性分别为85.2％和89.7％。但是Hu等的研究说明尿液Mig可诊断移植肾功能障碍，并没有特异性针对急性排斥的诊断结果。Ingeborg A.Hauser等(J Am SocNephrol 16：1849-1858，2005)对54例正常肾功能者和15例急性排斥者的研究显示尿液Mig可预测急性排斥，具有较好的诊断价值，但是该研究样本量少，只纳入了15例急性排斥者。Stephan R.Lederer等(Nephron Clin Pract2003；94：c19-c26)等研究显示急性排斥和慢性移植肾失功时尿液C4d含量较正常者显著升高，尿液C4d分泌有可能成为诊断急性排斥的指标。

从以上这些已有研究结果可见，利用尿液单个指标来诊断急性排斥，不能同时保证较好的敏感性和特异性；同时，目前的研究结果大都源于少量的研究样本，这样的研究结论因样本量少而使其结果具有很多的不确定因素，因此更适合于作为理论研究而使用，其与真正的应用于临床诊断还有较大的距离，无法应用于临床诊断。

BLC是B淋巴细胞特异性趋化因子，又称为CXCL13，BCA1，已有研究报道移植肾急性排斥时，免疫组化染色肾间质有BLC阳性B细胞浸润，但目前尚未有尿液BLC细胞因子含量用于鉴别急性排斥类别(细胞性排斥还是抗体介导的排斥)的相关报道。目前对于急性排斥的诊断和排斥类型(细胞性排斥还是抗体介导的排斥)的鉴别仅依赖于肾组织活检，而上所述活检具有局限性和创伤性的缺点。因此利用无创性技术手段，联合尿液多个细胞因子达到急性排斥和排斥类型的无创性诊断具有非常重大的意义。

发明内容