[发明专利]一种东北低温产沼气混合微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种混合微生物菌剂，其特征是由绿色木霉、枯草芽孢杆菌、恶臭假单胞菌、地衣芽孢杆菌、产碱杆菌的发酵菌液混合而成。

2.根据权利要求1所述的混合微生物菌剂，其特征在于其配方为(重量份)：绿色木霉1.4-1.8份，枯草芽孢杆菌1.8-2.3份，恶臭假单胞菌4.1-6.5份，地衣芽孢杆菌1.1-1.5份，产碱杆菌0.1-0.2份，以上5种菌液中有效活细胞数都大于10亿个/毫升。

3.根据权利要求1所述的混合微生物菌剂还包括其固体剂型，其特征在于液体混合微生物菌剂与吸附剂混合成固体剂型，其特征还在于液体混合微生物菌剂加入保护剂真空低温脱水干燥制成休眠态干粉。

4.根据权利要求3所述的混合微生物菌剂固体剂型，其特征在于所述吸附剂选用草炭或者小麦麸皮，吸附剂重量与液体混合微生物菌剂重量比为(4～9)∶1。

5.根据权利要求3所述的混合微生物菌剂固体剂型，其特征在于所述保护剂为脱脂奶粉，添加量为5种菌干物质总重量3-7％。

6.根据权利要求1-5所述的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)绿色木霉菌液：

采用PDA培养基作为菌种培养活化的培养基。液体培养基(发酵培养基)组成：麸皮5.0g，米糠12.0g，(NH₄)₂SO₄ 2.0g，KH₂PO₄ 1.0g，CaCl₂ 1.0g，葡萄糖6.0g，自来水1000mL，pH5.3-3.7；

发酵培养条件：培养(发酵)温度为28-30℃，转速为200r/min，通气量1∶1(v∶v/min，与发酵液的体积比)，培养至对数生长期；

(2)枯草芽孢杆菌菌液：

菌种培养活化及发酵培养基均采用牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，自来水1000mL，pH7.2-7.4；

发酵培养条件：培养(发酵)温度为23-26℃，转速为150r/min，通气量1∶1(v∶v/min，与发酵液的体积比)，培养至对数生长期；

(3)恶臭假单胞菌菌液：

菌种培养活化及发酵培养基均采用牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，自来水1000mL，pH7.2-7.4；

发酵培养条件：培养(发酵)温度为23-26℃，转速为160r/min，通气量1∶1(v∶v/min，与发酵液的体积比)，培养至对数生长期；

(4)地衣芽孢杆菌菌液：

菌种培养活化及发酵培养基均采用牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，自来水1000mL，pH7.0；

发酵培养条件：培养(发酵)温度为25-30℃，转速为200r/min，通气量1∶1(v∶v/min，与发酵液的体积比)，培养至对数生长期；

(5)产碱杆菌菌液：

菌种培养活化及发酵培养基均采用(NH₄)₂SO₄2.0g，NaCl 10.15g，K₂HPO₄2.0g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，酵母膏5g，自来水1000mL，pH8.0；

发酵培养条件：培养(发酵)温度为28-30℃，转速为200r/min，通气量1∶1(v∶v/min，与发酵液的体积比)，培养至对数生长期；

(6)上述5种微生物，菌液按比例混合配比制成，或者将混合后的液体菌剂采用吸附剂吸附成固体菌剂剂型，也可以将混合后的液体菌剂加保护剂真空低温脱水干燥制成休眠态干粉。