[发明专利]一种超高效液相色谱-串联四级杆质谱同时测定中药中100种农药残留的方法

说明书

发明领域

本发明属于分析化学领域，具体而言，本发明涉及一种同时分析中药中100种农药残留物含量的超高效液相色谱-串联四级杆质谱方法。

技术背景

农药残留是指农药使用后残存于生物体、农副产品和环境中的农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。农药的发明和使用在提高农作物产量的同时也带来了很多负面作用。

中药作为一种特殊的物质，由于在治疗疾病和强身健体方面具有独特效果使得需求量不断增大，目前野生药材远远满足不了市场需求，大部分中草药都依赖于人工栽培。为了保证药材质量和产量，在栽培过程中药农不得不大量使用各种类型的农药，因此中药中农药的污染不容忽视。

农药残留检测方法主要分为前处理和检测两部分。目前，中药中农药残留的前处理方法大多采用传统的提取和净化方法，容剂消耗量大，操作过程繁琐，分析周期长，且易造成环境污染。中药相对于其他作物而言，其成分的特殊性和复杂性对前处理的要求更为严格，一些其他领域较为先进的前处理技术不能直接引用进来。Hajou等(Hajou M K，Afifi U，Battah H.Comparative determinationof multi-pesticide residues in Piminella anisum using two different AOACmethods.Food Chemistry，2004，88：469-478)以两种美国农业化学协会(AOAC)指定的方法为指导分析中药茴香中有机氯、有机磷、拟除虫菊酯等农药，认为一般的多种类农药残留前处理方法不能无条件应用于特定中药，需两种以上方法方能实现准确定量。然而，这无疑增又加了实验的工作量和成本，与农药残留分析的发展趋势背道而驰。

迄今为止，在中药农药残留检测领域，气象色谱一直居于主导地位，气象色谱-质谱联用技术和液相色谱-质谱联用技术在中药农药残留分析中的应用很少，超高效液相色谱-质谱联用技术几乎没有应用。研究范围主要包括单个农药残留分析或单种类农药残留分析(吴永江，朱炜等，液-质联用法测定铁皮石斛和西洋参及制剂中多菌灵残留，分析化学研究简报，2006，34(2)，235-238)，多类农药残留同时分析的方法研究较少。因此，存在分析时间长，不能同时分析检测多种类农药残留，分析过程繁琐，成本高等问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种超高效液相色谱-串联四级杆质谱同时测定中药中100种农药残留的方法。目前为止，此方法尚未在中药农药残留检测领域应用。解决主要问题如下：

1建立了一种简单、廉价、有效的中药中多类农药残留的前处理方法。本方法的核心是使用加入类分析保护剂(乙酸)的单一溶剂(乙腈)提取农药，并通过具有更强吸水功能的试剂无水硫酸镁代替常用的无水硫酸钠干燥提取溶剂，最后采用N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化碳黑(GCB)等净化，去除脂肪酸、有机酸和色素等杂质。与过去的中药农药残留前处理方法相比，具有简便、易操作、低成本(不许昂贵的仪器设备，所有操作步骤手动即可)、溶剂使用少、低污染、对环境友好(每个样品只需10mL有机溶剂)等特点。

2建立了一种可同时检测100种农药残留的分析方法。本方法将超高效液相色谱与串联质谱相结合，不但达到了高分辨率、高灵敏度、高选择性的要求，而且极大地缩短了分析时间(整个分析过程可在15分钟内完成)，显著提高了工作效率，目前超高效液相色谱与串联质谱相结合尚未在中药农药残留检测领域应用。

实施本发明的技术方案如下：

[1]农药标准品储备液的制备：分别称取100种农药标准品各10mg置于10mL容量瓶中，选择乙腈、甲醇或丙酮分别溶解农药标准品并定容至刻度，使100种农药标准品储备液的浓度均为1000μg/mL，农药标准品储备液-18℃保存。

[2]农药混合标准品溶液的制备：将上述100种农药标准品储备液分别取出，然后混合到一起，用乙腈定容，按照表3中的每种农药标准品在农药混合标准品溶液中的浓度数值制备农药混合标准品溶液。