[发明专利]食源性致病菌检测试剂盒及检测方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及一种食源性致病菌检测试剂盒及检测方法。

【背景技术】

人类食用的食品种类繁多，通过食物所传播的病原体也各种各样，包括细菌、病毒、立克次体、产毒藻类、寄生虫及蕈等大型真菌等不同种类。日常生活中，细菌，特别是食源性致病菌污染的食品的误食用，导致的食品中毒事件最为常见。

传统的食源性致病菌的检测，主要是采用细菌培养的方法，这种方法检测结果较准确，但是耗费时间长，操作步骤繁琐；此外，还可以采用实时荧光PCR法检测，此方法特异性强，但是一次实验只能检测一种病原目标物，同时检测大量的病原菌则不能很好地应付。这两种方法在检测多种食源性致病菌时，往往都需要耗费较长的时间，这也延误了诊断和治疗的最佳时机。

【发明内容】

基于此，有必要提供一种可以在短时间内检测多种食源性致病菌的食源性致病菌检测试剂盒及采用上述食源性致病菌检测试剂盒的食源性致病菌检测方法。

一种食源性致病菌检测试剂盒，包括选自如下12组引物中的至少一组：

第1组引物用于扩增金黄色葡萄球菌的如SEQ ID NO.1所示的核酸片段；

第2组引物用于扩增沙门氏菌的如SEQ ID NO.2所示的核酸片段；

第3组引物用于扩增大肠杆菌O157:H7的如SEQ ID NO.3所示的核酸片段；

第4组引物用于扩增志贺杆菌的如SEQ ID NO.4所示的核酸片段；

第5组引物用于扩增单增李斯特菌的如SEQ ID NO.5所示的核酸片段；

第6组引物用于扩增蜡样芽孢杆菌的如SEQ ID NO.6所示的核酸片段；

第7组引物用于扩增小肠结肠炎耶尔森氏菌的如SEQ ID NO.7所示的核酸片段；

第8组引物用于扩增弧菌属的如SEQ ID NO.8所示的核酸片段；

第9组引物用于扩增副溶血弧菌的如SEQ ID NO.9所示的核酸片段；

第10组引物用于扩增霍乱弧菌的如SEQ ID NO.10所示的核酸片段；

第11组引物用于扩增梭状芽孢杆菌属的如SEQ ID NO.11所示的核酸片段；

第12组引物用于扩增弯曲杆菌的如SEQ ID NO.12所示的核酸片段。

优选的，所述第1组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.13所示，下游引物序列如SEQ ID NO.25所示；

所述第2组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.14所示，下游引物序列如SEQ ID NO.26所示；

所述第3组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.15所示，下游引物序列如SEQ ID NO.27所示；

所述第4组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.16所示，下游引物序列如SEQ ID NO.28所示；

所述第5组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.17所示，下游引物序列如SEQ ID NO.29所示；

所述第6组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.18所示，下游引物序列如SEQ ID NO.30所示；

所述第7组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.19所示，下游引物序列如SEQ ID NO.31所示；

所述第8组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.20所示，下游引物序列如SEQ ID NO.32所示；

所述第9组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.21所示，下游引物序列如SEQ ID NO.33所示；

所述第10组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.22所示，下游引物序列如SEQ ID NO.34所示；

所述第11组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.23所示，下游引物序列如SEQ ID NO.35所示；

所述第12组引物：上游引物序列如SEQ ID NO.24所示，下游引物序列如SEQ ID NO.36所示。

优选的，还包括探针，所述探针为如下12个与所述12组引物对应的核酸片段至少一种：

第1个探针与如SEQ ID NO.1所示的核酸片断特异性结合，序列如SEQ IDNO.37所示；

第2个探针与如SEQ ID NO.2所示的核酸片断特异性结合，序列如SEQ IDNO.38所示；

第3个探针与如SEQ ID NO.3所示的核酸片断特异性结合，序列如SEQ IDNO.39所示；

第4个探针与如SEQ ID NO.4所示的核酸片断特异性结合，序列如SEQ IDNO.40所示；