[发明专利]一种从光叶小蜡树枝和叶中提取分离山萘酚的方法

说明书

技术领域

本发明涉及提取分离方法，特别涉及一种从光叶小蜡树枝和叶中提取分离山萘酚的方法。 

背景技术

光叶小蜡树（L. sinense Lour var ni ti dum Ruhd）是木择科Oleaceae女贞属Ligustrum Linn的植物，为常绿灌木。化学成分研究表明：主要含有烷烃、高级脂肪醇，甾体类化合物，三萜类化合物，黄酮类化合物，其中山萘甙的含量较高。 

山萘酚（Kaempferol ），别名：山柰酚-3山柰素、山柰黄酮醇、四羟基黄酮、百蕊草素Ⅲ；山奈酚属于黄酮醇类(分子式C₁₅H₁₀O₆ ；分子量286.23)，黄色针晶，熔点276℃-278℃ 山奈酚微溶于水，溶于热乙醇，乙醚和碱；药理作用：抗菌，对黄色葡萄球菌及绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌均有抑制作用。止咳，治疗支气管炎。抑酶，抑制眼醛糖还原酶，有利于糖尿病白内障的治疗。具有诱变剂活性，当浓度为1×10-4mol/L时，可抑制淋巴细胞增殖。主要用于抗癌、抑制生育、抗癫痫、抗炎、抗氧化剂、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、止咳。 

目前制备山萘酚的方法，多是从原植物中直接分离山萘酚，其山萘酚含量低，其工艺相对复杂，收率低。而目前利用酶解从植物中提取分离山萘酚的方法还未见报道。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种从光叶小蜡树枝和叶中提取分离山萘酚的方法，该方法简单易行。 

为了实现上述任务，本发明采用的技术解决方案是： 

一种从光叶小蜡树枝和叶中提取山萘酚的方法，其特征在于按以下步骤进行：

1）首先取光叶小蜡树枝和叶的粉末为原料，用质量浓度为5%的氢氧化钙水温浸提取2次，第一次提取使用的质量浓度为5%的氢氧化钙水用量为原料总质量的8倍，第二次提取使用的质量浓度为5%的氢氧化钙水用量为原料总质量的5倍，提取时间均为2h，合并两次提取液，调提取液pH值至8-9，备用；

    2）纯化：将调节pH值后的提取液上大孔树脂柱，树脂型号为AB-8, pH值为8-9，上样提取液量为5-6倍树脂柱体积，吸附流速1.8倍/h；待吸附饱和后用去离子水冲洗液冲柱，当流出液澄清后，洗后的柱体填料用质量浓度0.8%-1%的氢氧化钠洗脱液洗脱，洗脱液用量为2倍-2.5倍树脂柱体积，流速1倍/h，收集洗脱液；

3）酶解：将所得的洗脱液倒入反应釜中，调pH值至5后加热到50℃保温，在保温条件下加入5-7倍量α－L－鼠李糖苷酶，酶解6-8h；

4）结晶：将酶解物放冷，离心，得到山萘酚粗品，山萘酚粗品用乙醇重结晶后，即可得黄色针状结晶的山萘酚精品。

本发明以氢氧化钙水溶液为提取溶媒，树脂可重复再生利用，用酶解转化率高、大大提高了资源的利用率；其方法操作简单、生产成本低，工业化前景较好，易于实现工业化生产。 

具体实施方式

以下结合发明人给出的实施例对本发明作进一步的详细说明。 

本发明的从光叶小蜡树枝和叶中提取山萘酚的方法，包括下列步骤： 

首先取光叶小蜡树枝和叶的粉末10kg，山萘甙含量0.9%，用质量浓度5%的氢氧化钙水提取2次，第一次加入量为80L，80℃～90℃条件下提取 2h，第二次加入量为50L，80℃～90℃条件下提取2ｈ，合并两次提取液，调提取液pH值为8-9，备用；

将调节pH值后的提取液上大孔树脂柱，树脂型号为AB-8, pH值为8-9，上样提取液量为60L，吸附流速1.8倍/ｈ；待吸附饱和后用去离子水冲洗液冲柱，当流出液澄清后，洗后的柱体填料用质量浓度为0.8%～１%的氢氧化钠洗脱液洗脱，洗脱液用量为2～2.5倍树脂柱体积，流速1倍/ｈ，收集洗脱液。

将所获得的洗脱液倒入反应釜中，调pH至5后加热到50℃后保温，然后在保温条件下加入54gα－L－鼠李糖苷酶，酶解6-8H； 

将酶解物放冷，离心，得到含量为72%的山萘酚粗品45g，山萘酚粗品用乙醇饱和溶解，然后加入0.5%活性炭脱色，过滤后浓缩到1/3倍后加入3倍水再结晶，即可得黄色针状结晶的含量为98%的山萘酚精品。