[发明专利]荧光素标记物及基于荧光偏振的有机磷农药均相多残留免疫检测方法

权利要求书

1.一种应用于有机磷农药均相多残留免疫检测的荧光素标记物，其特征在于具有式（Ⅰ）、（Ⅱ）或（Ⅲ）所示结构：

（Ⅰ）；

（Ⅱ）；

（Ⅲ）。

2.一种权利要求1所述荧光标记物的制备方法，其特征在于是采用异硫氰酸荧光素与有机磷农药半抗原偶联得到，包括以下步骤：

（1）制备乙二胺衍生化的异硫氰酸荧光素；

（2）活化有机磷农药半抗原：将有机磷农药半抗原、N,N’-二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀亚酰胺溶于N,N’二甲基甲酰胺中，反应后去除沉淀得活化的半抗原上清液；

（3）在步骤（2）的半抗原上清液中加入乙二胺衍生化的异硫氰酸荧光素，反应产物用制备型薄层层析板分离纯化即得荧光标记物。

3.权利要求1所述荧光素标记物的应用，其特征在于应用于对环境水、水果或蔬菜的有机磷农药均相多残留免疫检测方面。

4.一种基于荧光偏振原理的有机磷农药均相多残留免疫检测方法，其特征在于将有机磷农药抗体和权利要求1所述荧光素标记物加入待测样品形成混合物，测定所述混合物的荧光偏振值，根据有机磷农药标准品建立的标准曲线计算待测样品中有机磷农药的浓度；

所述有机磷农药为对硫磷、甲基对硫磷、蝇毒磷、三唑磷、辛硫磷、喹硫磷、除线磷、伏杀硫磷、乙基谷硫磷、甲拌磷、乙拌磷、异氯磷、杀螟腈、乙基溴硫磷、毒死蜱、乙硫磷、二嗪农、氯唑磷、治螟磷和/或杀螟硫磷；

所述有机磷农药抗体为基于半抗原[4-((二乙氧基硫代磷酸基)氧)苯甲酸]制备的多克隆抗体、单克隆抗体或基因工程抗体。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于所述荧光素标记物为权利要求1所述具有结构式（Ⅱ）的标记物。

6.根据权利要求4所述的基于荧光偏振原理的有机磷农药均相多残留免疫检测方法，其特征在于所述方法采用96孔板。

7.一种权利要求4、5或6所述检测方法的应用，其特征在于应用于对环境水、水果或蔬菜的有机磷农药均相多残留免疫检测方面。