[发明专利]黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用，属于医药领域。

一、背景技术

黄芩苷(Baicalin)是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，具有明显的抗真菌活性，尤其对酵母型真菌具选择性作用，最低抑菌浓度(MIC)在70-100μg/ml之间。但未见黄芩苷用于治疗细胞性肺炎报道。

细菌性肺炎是感染肺炎双球菌、葡萄球菌、链球菌、流感杆菌、肺炎杆菌等所引起。细菌性肺炎占成人各类病原体肺炎的80％。因葡萄球菌感染所致肺炎病情多较严重，目前的治疗方案通常使用苯唑西林(苯唑青霉素)及氯唑西林(氯唑青霉素)，备选第1代、第2代头孢菌素。但使用抗生素治疗最大的缺点在于易产生耐药性，会使治疗失败。因此需要寻找无耐药性且安全可靠的药物。黄芩苷来源于传统中药，本发明研究证实其对细菌性肺炎，尤其是金葡菌感染肺炎有积极有益的效果。

二、发明内容

黄芩苷的分子结构如下：

本发明通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证实其治疗金葡菌感染作用。

三、具体实施方式

1.溶血试验

纯化的α-溶血素于96孔板中作连续的二倍稀释，每个孔中加入10⁷个兔红细胞，于37℃中孵育30h后离心。使红细胞溶解的最高稀释倍数视为溶血滴度(Hemolysis titre)。不加黄芩苷和加入不同浓度的黄芩苷后α-溶血素的溶血滴度如下表1：

表1.黄芩苷对α-溶血素溶血活性的抑制作用

  黄芩苷(μg/ml) 溶血滴度(Hemolysis titre)  0  2048  16  32  8  128  4  256  2  1024

2.人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验

金葡菌8325-4于TSB培养基中培养至OD_600nm＝0.5，取5ml的细菌培养物，离心并重悬于10ml的F12K培养基中。A549细胞于F12K培养基(加入10％胎牛血清)中于37℃，5％CO₂培养24小时后，以1.5×10⁴个细胞/孔铺于96孔细胞培养板中，每孔100μl。细胞贴壁后，加入100μl金葡菌悬液，并加入不同浓度的黄芩苷，置于细胞培养箱中于37℃，5％CO₂共培养8h。加入live(green)/dead(red)试剂，后于激光共聚焦显微镜(LSCM)下观察A549细胞的状态，活细胞显绿色，死细胞显红色。

结果表明，黄芩苷能够保护金葡菌α-溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损伤，该作用呈现剂量依赖性。

3.小鼠金葡菌肺炎的实验治疗学研究

3.1小鼠金葡菌肺炎模型

C57BL/6J小鼠(雄性，18-22g)经乙醚麻醉后，经鼻给予30μl金葡菌悬液(金葡菌8325-4)，小鼠平躺直至苏醒，建立小鼠金葡菌肺炎的模型。致死试验给与4×10⁸CFUs的金葡菌，而组织病理学考察给与2×10⁸CFUs的金葡菌。

3.2保护率试验