[发明专利]泌尿生殖道病原菌分离鉴定用显色培养基有效
申请号: | 201110093267.6 | 申请日: | 2011-04-14 |
公开(公告)号: | CN102206697A | 公开(公告)日: | 2011-10-05 |
发明(设计)人: | 王则宇;王利英;吴学炜;孙昊权;崔晓晓;孙若楠;郑业焕;杨红云;付光宇 | 申请(专利权)人: | 郑州安图绿科生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34;C12Q1/04 |
代理公司: | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人: | 王霞 |
地址: | 450016 河南省郑州*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 泌尿 生殖 病原菌 分离 鉴定 显色 培养基 | ||
技术领域
本发明涉及检测病原菌用显色培养基,尤其是涉及一种泌尿生殖道病原菌分离鉴定用显色培养基,该显色培养基可同步鉴定多种细菌性、真菌性病原菌。
背景技术
泌尿生殖道感染是指病原体直接侵入尿路或生殖道,在尿道或阴道环境中生长繁殖,并侵犯黏膜或组织而引起损伤。
引起泌尿生殖道感染的细菌性病原菌主要为革兰氏阴性杆菌,其中以普通大肠埃希氏菌为主,约占50~70%,其它还有克雷伯氏菌、变形杆菌、假单胞菌等,近年来革兰氏阳性菌引起的泌尿生殖道感染呈上升趋势,主要为肠球菌和凝固酶阳性金黄色葡萄球菌,同时凝固酶阴性的表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的感染率也呈上升趋势。
真菌性病原菌如念珠菌引起的霉菌性阴道炎,也称念珠菌性阴道炎,其发病率已高于滴虫性阴道炎,多见于幼女、妇女、糖尿病患者以及绝经后曾用较大剂量雌激素治疗的患者。引起阴道感染的念珠菌80%~90%系白色念珠菌,白带增多的非孕妇女中,约有10%,孕妇中约有30%在阴道中有此菌寄生,当阴道糖原增加、酸度升高时,或在机体抵抗力降低的情况下,便可成为致病的原因,长期应用广谱抗生素和肾上腺皮质激素,可导致念珠菌感染大为增加。
现有检测泌尿生殖道病原菌的方法主要有下述几种:I.普通培养法:尿道细菌传统的鉴定方法需要麦康凯和血平板互补培养,初步区分乳糖阳性细菌和乳糖阴性细菌,再根据需要做进一步的生化反应以确定细菌的种类。在鉴定病原菌到属、种时,需要多种生化及其他实验,耗时、费力、程序繁杂。II.分子生物学方法:随着近年来分子生物学的发展,逐渐出现了一些应用PCR检测大肠杆菌、粪肠球菌、白色念珠菌等泌尿生殖道感染菌的方法,PCR法虽然简便快速、灵敏度高,但PCR方法需要昂贵的仪器设备,更重要的是PCR后处理产生污染导致的假阳性问题严重。III.生化方法:无论是生化鉴定仪还是用于鉴别细菌的生化反应管、反应条、反应培养基等,都只能对细菌的纯培养进行鉴定,这就需要首先对标本进行分离培养,整个过程耗时费力、特异性差、灵敏度低,不利于病原菌快速准确的检出。IV.显色培养基培养法:显色培养基由于含有特殊的显色物质,无需通过任何仪器,仅通过肉眼观察菌落的色彩即可对待测标本实现病原菌属间甚至种间的分析;目前可用于泌尿生殖道病原菌检测的显色培养基主要有大肠杆菌显色培养基、ECC显色培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、UTI定位显色培养基和念珠菌显色培养基等,通过这些显色培养基的应用可以对引起泌尿生殖道感染的大肠杆菌、克雷伯氏菌、肠球菌、白色念珠菌、热带念珠菌等做出初步的分离鉴定,但各有其局限性:
①.大肠杆菌显色培养基:能分离鉴定大肠杆菌,但不能同时分离鉴定肠球菌、念珠菌、克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌、葡萄球菌等;
②.ECC显色培养基:能分离鉴定大肠杆菌、克雷伯氏菌,但不能同时分离鉴定肠球菌、念珠菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌、葡萄球菌等;
③.金黄色葡萄球菌显色培养基:能分离鉴定金黄色葡萄球菌,但不能同时分离鉴定大肠杆菌、克雷伯氏菌、念珠菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌等;
④.UTI定为显色培养基:能够对大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、肠球菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌、金黄色葡萄球菌等做出定位分析,但不能分离鉴定念珠菌等;
⑤.念珠菌显色培养基:能够分离鉴定白色念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌,但不能用于大肠杆菌、克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、肠球菌。
目前临床上对患者标本所作的病原菌培养鉴定以传统方法为主,采取分离培养、镜检观察、生化鉴定等多个步骤,检测周期长,操作繁琐,已经不能满足临床对泌尿生殖道病原菌快速、便利检测的需求,尽管目前市场上存在几种用于尿道细菌和念珠菌检测的显色培养基,如科玛嘉定位显色培养基、梅里埃定位显色培养基、科玛嘉念珠菌显色培养基等,但这些显色培养基或者仅能用于检测细菌性病原菌,或者仅能用于检测念珠菌,无法满足对引起生殖道感染的细菌性病原菌和念珠菌同时分离鉴定,存在漏检的可能,不利于临床对病原菌的全面判断,从而影响疾病的诊断和治疗。
发明内容
本发明的目的在于提供一种泌尿生殖道病原菌分离鉴定用显色培养基,该显色培养基可同时鉴定大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、白色念珠菌、热带念珠菌和克柔氏念珠菌等多种细菌性和真菌性病原菌,方便快捷。
为实现上述目的,本发明可采取下述技术方案:
本发明所述的泌尿生殖道病原菌分离鉴定用显色培养基,它至少包括己糖胺酶底物、β-D-半乳糖苷酶底物和β-D-葡萄糖苷酶底物三种显色底物。
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