[发明专利]茄子花青素合成二氢黄酮醇4-还原酶的基因序列

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种生物技术领域的基因序列，具体是一种茄子花青素合成二氢黄酮醇4-还原酶的基因序列。

背景技术

花青素是自然界仅次于叶绿素的植物体第二大色素类型，属于类黄酮类物质。花青素是一种水溶性色素，偏酸性，被贮藏在植物细胞的液泡中。植物的许多器官和组织的颜色都是由花青素决定的。近几十年来，作为多酚类物质的花青素的保健作用开始被深入研究，花青素所具有的抗氧化，自由基清除等作用，越来越受到人们的重视。茄子，尤其是紫色茄子，是为数不多的富含花青素的蔬菜种类，营养价值丰富。

Davies等在《Euphytica》2003年第三卷第259-268页发表的《 Enhancing anthocyaninproduction by altering competition for substrate between flavonol synthase and

与同为茄属的马铃薯和番茄的深入研究相比，茄子的花青素生物合成的研究非常滞后。如今，提高植物体内类黄酮(花青素)类物质已经成为了植物育种的一个重要的方向。而育种的基础就是完全理解花青素合成和调节的因子以及相关酶类的作用。茄子作为一种重要的蔬菜作物，对其花青素合成路径的研究将会对于高花青素茄子品种的育种，以及茄子的抗氧化，保健作用的进一步开发提供理论基础。

经对现有技术文献的检索，尚未发现与本发明相同或者相似的技术主题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，公开了茄子花青素合成二氢黄酮醇4-还原酶的基因序列。利用本发明的茄子二氢黄酮醇4-还原酶，可筛选出与茄子二氢黄酮醇4-还原酶相关发生相互作用的物质、受体、抑制剂或拮抗剂等，利用本发明可获得在高花青素、抗紫外保护、抗水分胁迫等方面具有重要特性的茄子品种。

本发明是通过以下技术方案实现的，

本发明涉及一种茄子花青素合成二氢黄酮醇4-还原酶的基因序列，该序列具有SEQ IDNO.1中从核苷酸第1-1149位所示的核苷酸序列。

所述的序列编码的多肽具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

本发明还涉及一种茄子花青素合成二氢黄酮醇4-还原酶的基因序列，该序列具有SEQ IDNO.3中从核苷酸第1-1149位所示的核苷酸序列。

所述的序列编码的多肽具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

本发明根据茄子基因序列数据库，运用生物信息学手段，通过序列比较和电子克隆拼接，设计出合适的引物，用分子克隆的方法，克隆出紫色茄子和白色茄子中二氢黄酮醇4-还原酶(SmDFR)基因；经过功能鉴定，确定分离出的是二氢黄酮醇4-还原酶基因，紫色茄子和白色茄子中，SmDFR基因序列有两个碱基差异，氨基酸序列有一个氨基酸残基的差异。并且证明了SmDFR可能是造成茄子花青素差异的关键基因。

本发明具有如下的有益效果：利用本发明的茄子二氢黄酮醇4-还原酶，可筛选出与茄子二氢黄酮醇4-还原酶相关发生相互作用的物质、受体、抑制剂或拮抗剂等，利用本发明可获得在高花青素、抗紫外保护、抗水分胁迫等方面具有重要特性的茄子品种。

本发明涉及的大肠杆菌DH5α，BL-21菌株已在《萨姆布鲁克J，拉塞尔D W.分子克隆实验指南[M].黄培堂，王嘉玺，朱厚础，等译.第3版.北京：科学出版社，2002》中公开；大肠杆菌DH5α，BL-21可通过公开市售的商业渠道取得，如上海天根生物公司，公司地址：上海市漕溪路258弄27号航星商务楼1号楼606室。

具体实施方式

下面结合具体的实施例子，进一步阐述本发明的具体实施方式。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等(1989)编著的分子克隆实验手册(New York：Cold SpringHarbor Laboratory Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实验所用的PrimeScript^TM 1st Strand cDNA Synthesis Kit、高保真的Taq酶、pMD19-T载体是大连TaKaRa公司产品。

实施例1

紫色茄子二氢黄酮醇4-还原酶(YLP SmDFR)的克隆、表达和鉴定

步骤一、紫色茄子SmDFR二氢黄酮醇4-还原酶基因的克隆

1、茄子实验材料取材