[发明专利]一株具有抗菌作用的细黄链霉菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一株新筛选的具有抗菌作用的细黄链霉菌株及其应用。

背景技术

植物根际土壤中含有大量的具有固氮、解磷、解钾及分泌植物激素等功能的微生物，通过不同的方式达到促进植物生长的作用，植物根际促生菌(plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)就是其中一类能定殖于根系并促进植物生长的细菌，可被用来作为生物有机肥料的良好菌株。已有研究表明，多种菌株混合培养时个菌株之间存在着复杂的相互作用。一类微生物可以为另一类的生长提供重要的物质，或为其创造更有利的条件，有的甚至依赖其他微生物而存活。各菌株之间可能进行直接或间接的相互作用，互相提供所需的营养，转移或消除抑制物质，或通过一些物理或生化机制刺激彼此之间的生理活动。谢应先报道的土壤习居菌—固氮菌和解磷解钾菌相互之间没有抑制作用或者只有微弱的抑制作用。饶正华和常慧萍等也都研究过固氮菌、解磷菌和解钾菌之间的相互作用，显示这几种根际促生菌确实能共同发挥作用促进植物生长。夏觅真在其研究中发现有的解磷菌可能会抑制解钾菌的生长，但当固氮菌、解磷菌解钾菌共同培养时有助于磷钾的释放。当前的生物有机肥中所含的菌种数量众多，大都包含有酵母菌、固氮菌、解磷解钾菌、放线菌和霉菌等，这些不同菌种、不同菌株之间的互相作用更为复杂多变，单纯的研究固氮菌和解磷解钾菌之间的相互作用显得较为薄弱，更为重要的是前人的研究很少去关注肥料中的菌种和土壤固有的菌株之间的相互作用。因此，了解这些不同类微生物之间的作用，对合理选择菌剂的最优组合，对于开发相关的微生物有机肥和微生态制剂具有重大的研究价值。

发明内容

发明人在对复合微生物有机肥中的菌种与土壤固有微生物之间的相互作用的研究中筛选了一株具有较强抑菌作用的细黄链霉菌株，初步鉴定其为链霉菌属。其代谢产物中存在抑菌活性物质，不仅可以抑制土壤固有细菌，还能抑制人体的一些原核病原微生物。

由此，本发明提供了一株具有抗菌作用的细黄链霉菌GNF1（Streptonmyces microflavus GNF1），2011年3月13日保藏于“ 中国典型培养物保藏中心”，保藏号为 CCTCCNO:M2011061。此菌株以下简称为“GNF1”。

本发明涉及的菌株基内菌丝多分枝，不断裂，气生菌丝丰富，孢子链直且长，偶有波曲，孢子呈柱状；菌株在多数培养基上生长良好，气高氏淀粉琼脂上气生菌丝体白至杏仁黄色，成熟时粉红发紫；基内菌丝体玳瑁黄风帆黄色，可溶性色素微染；克氏合成1号琼脂、察氏琼脂、淀粉铵盐琼脂：气丝粉红色或粉红秸草色，毛状和粉状；基丝好，无色或略微黄色、秸草色、浅棕色或微黄褐色，无可溶色素。

所述细黄链霉菌GNF1的生长温度范围为10～40℃；生长pH 范围为6.0～8.5； 能在含0～1.5 mol／L NaCl的ISP2和MBA琼脂上生长；明胶液化、淀粉水解、硫化氢产生阴性；不能水解Tween20和酪素；黑色素产生、牛奶胨化、纤维素水解和硝酸盐还原阴性；菌株全细胞水解产物中含氨基酸和糖类。

所述细黄链霉菌GNF1,G+C含量为71.2％，16SrRNA扩增序列长度为1458 bp；与细黄链霉菌（Streptonmyces microflavus Krainsky）的16S rRNA序列仅相差6个碱基，同源性达99.6％。

所述细黄链霉菌GNF1及其发酵液具有较强的抗菌作用，包括与连霉素做对照，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌或植物根际促生菌都表现了良好的抑制作用。所述菌株GNF1的抑菌物质具有较强的脂溶性，及良好的光稳定性和热稳定性。发酵液在紫外灯下照射30 min后，抑菌活性基本没变；在30℃～45℃之间抑菌活性稳定。

根据对其形态培养特征、生理生化特性和系统发育分析的研究结果，细黄链霉菌菌株GNF1具有链霉菌(Streptomyces)菌株典型的特征，应归属于此属。GNF1菌株虽然同细黄链霉菌的16S rRNA扩增序列同源性达99.6％ ，但仅依据16SrRNA确定其种的分类地位存在一定的局限性。其最终的分类地位仍需与模式种 Streptonmyces microflavus 进行DNA分子杂交，并结合两菌株的生理生化特性才能确定。因此，本发明涉及的菌株为新菌株。

附图说明

图1是细黄链霉菌GNF1发酵上清液对GNW、HP2和 E.coli生长的抑制作

用的曲线图。