[发明专利]一种快速制备DNA结合蛋白的技术

权利要求书

1.一种制备DNA结合蛋白的方法，其特征在于该方法为：

(1)DNA-蛋白质复合物的提取：采用各种方法破碎的细胞，加入一定体积的DNA-蛋白质复合物提取液，充分混匀，静止2小时以上。然后离心，取上清。

(2)DNA-蛋白质复合物的析出：降低上清溶液中盐的浓度，在低温条件下静止，待DNA-蛋白质复合物析出。然后离心，取沉淀。

(3)DNA结合蛋白的制备：取沉淀，加入一定体积的DNA结合蛋白制备溶液，混匀，-20℃条件下静止2小时以上。然后离心，取沉淀。沉淀用少量丙酮溶液分散，再采用低温冷冻干燥，获得纯净的DNA结合蛋白。

2.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的提取，其特征在于所述的提取液含有高浓度的NaCl，其NaCl浓度在1-1.5mol/L。

3.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的提取，其特征在于所述的提取液含有0.1mol/L的EDTA。

4.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的提取，其特征在于所述的提取液含有0.1-0.2g/L的PMSF。

5.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的提取，其特征在于所述的提取液含有0.01mol/L的Tris-HCl或0.1mol/L磷酸缓冲液。

6.根据权利要求2所述的维持pH的缓冲盐成分，其特征在于该成分可以是磷酸盐、Tris-HCl等。

7.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的析出，其特征在于降低上清溶液中盐的浓度可以通过稀释或透析等方法达到。

8.根据权利要求1所述的DNA-蛋白质复合物的析出，其特征在于低温条件是指温度是2-6℃。

9.根据权利要求1所述的DNA结合蛋白的制备，其特征在于所述的制备液包含能溶解DNA而难溶解蛋白质的溶剂和降低蛋白质溶解性的成分。

10.根据权利要求9所述的能溶解DNA而难溶解蛋白质的溶剂，其特征在于所述的溶剂是指丙酮。

11.根据权利要求9所述的降低蛋白质溶解性的成分，其特征在于所述的成分是指三氯乙酸。