[发明专利]用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法

权利要求书

1.用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，包括将污泥堆肥发酵剂的生产菌种接种于含有碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行有氧发酵；其特征在于所述的制备过程包括如下步骤：

A、发酵

a、将斜面菌种分别活化后制成摇瓶种子；

b、将步骤a中的摇瓶种子等质量混配后经扩培制成种子液；

c、将步骤b中制备的种子液按照体积比=5%-10%的接种量接入灭菌后的发酵培养基，经通气发酵制成发酵液；

B、将步骤c中制备的发酵液经吸附、固定化于载体上制成发酵剂；

其中生产菌种选用枯草芽孢杆菌CGMCC1.1200（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌CGMCC1.520（Bacilluslicheniformis）、沼泽红假单胞菌CGMCC1.2180（Rhodopseudomonas palustris）、黑曲霉CGMCC3.350（Aspergillus niger）和热带假丝酵母CGMCC2.006（Candida tropicalis）;

步骤c中的灭菌后的发酵培养基由如下成分组成：

可溶性淀粉20g或玉米粉30g；硝酸钾1g；磷酸氢二钾0.5g；硫酸镁0.5g；氯化钠0.5g；硫酸亚铁0.01g；腐植酸5g;蒸馏水1000ml;

发酵培养基pH值=7.2-7.4；

步骤c中的发酵条件为：温度=37℃、pH值=7.8、时间为12小时、通风量为5-10升/分钟、搅拌转速为300转/分钟。

2.根据权利要求1所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤a采用平板划线法对菌种进行活化，活化培养基选用牛肉膏蛋白胨固体培养基。

3.根据权利要求1所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤a中的扩培是将活化后的斜面菌种分别接入不含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养液进行培养，培养条件是温度为30-37℃，转速为200-250转/分钟，培养时间为20-24小时。

4.根据权利要求1所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤b中的扩培培养基采用如下成分组成：

可溶性淀粉20g或玉米粉30g；硝酸钾1g；磷酸氢二钾0.5g；硫酸镁0.5g；氯化钠0.5g；硫酸亚铁0.01g；腐植酸5g;蒸馏水1000ml；

扩培培养基的pH值=7.2-7.4；

扩培的工艺条件如下：

按照摇瓶种子与扩培培养基的体积比=5%-10%的接种量，将摇瓶种子接入扩培培养基进行扩大培养；搅拌转速200-300转/分钟、通气量8-10升/分钟的条件下进行好氧发酵。

5.根据权利要求1或4所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤b或步骤c中的扩培或发酵终点的检测采用用分光光度法测定吸光值最大或用血球板显微计数法菌群数最大,其中用分光光度计测定吸光值最大的方法中测定条件为稀释10倍，波长为600nm。

6.根据权利要求1所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤B中的吸附剂选用草炭。

7.根据权利要求1或6所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的步骤B中的工艺条件如下：

按照体积比为发酵液：吸附剂=1：4-5的比例，将步骤c中的发酵液在室温下喷洒、搅拌、均匀混合于载体上制成发酵剂。

8.根据权利要求1-4中任一项所述的用于污泥堆肥的发酵剂的制备方法，其特征在于所述的培养基的灭菌条件为：压力=0.1Mpa、温度=121℃、时间30分钟。